一种环形阻滞探针、含有所述环形阻滞探针的扩增阻碍突变系统及其应用

摘要

本发明提供了一种环形阻滞探针、含有所述环形阻滞探针的扩增阻碍突变系统及其应用，所述环形阻滞探针按照5’‑3’方向为第一结合序列、环状序列和第二结合序列，所述第一结合序列和第二结合序列互为反向重复序列；所述环形阻滞探针的3’端末1位碱基与模板的野生型位点互补；所述环形阻滞探针的3’末端修饰有阻滞基团；所述环形阻滞探针的环状序列与模板互补。本发明向扩增阻碍突变系统中加入环形阻滞探针，在PCR开始前环形阻滞探针优先结合在野生型模板上，对野生型模板进行封闭，随后采用特异性引物对突变模板进行PCR扩增，显著提高了PCR扩增的特异性，扩大了线性范围，实现了低频率突变样本的精确定量。