人双调蛋白克隆至人工改造的表达载体pGEX-4T-1及其原核可溶性表达的研究

摘要

本发明公开了将人双调蛋白克隆至人工改造的表达载体pGEX‑4T‑1及其原核可溶性表达的研究成果，解决了真核外源基因在原核表达系统内易形成包涵体的问题。通过切除原核表达载体pGEX‑4T‑1上GST（谷胱甘肽转移酶）标签，添加促溶标签SUMO，构建重组质粒pGEX‑SUMO；然后将人双调蛋白基因AREG克隆至重组质粒pGEX‑SUMO上；再对目标蛋白可溶性表达条件进行优化，分离纯化出重组天然蛋白SUMO‑AREG；最后对SUMO‑AREG酶切去除标签，进一步纯化获得重组蛋白AREG。本发明能生产出具有天然结构的重组蛋白AREG，对后期人双调蛋白的生理功能的研究提供一个好的基础。