表达PEDV的M+N双基因的原核融合表达载体及应用

摘要

本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M+N双基因的原核融合表达载体。通过PEDV的M和N基因片段，利用Blunt‑E2表达载体，通过无缝克隆技术，构建出表达PEDV的M+N双基因的原核融合表达载体，并提供了其在基因工程蛋白重组表达中的应用。本发明是直接将纯化PEDV的M基因片段连接到Blunt‑E2哺乳动物原核融合表达载体中，不需要连接至单克隆载体PMD19‑T中，然后M+Blunt‑E2质粒通过同源重组技术，无缝拼接N基因片段，从而获得M+N双基因融合表达载体，其质粒通过PCR技术进行鉴定，测序准确后再转染在细胞中获得成功表达。因此，该原核融合表达载体的制备比较其他原核融合表达技术，具有操作步骤简单、反应时间短等特点。