法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2022-06-10
未缴年费专利权终止 IPC(主分类):C12N15/29 专利号:ZL2016104095654 申请日:20160613 授权公告日:20200807
专利权的终止
2020-08-07
授权
授权
2018-01-19
实质审查的生效 IPC(主分类):C12N15/29 申请日:20160613
实质审查的生效
2016-09-07
公开
公开
技术领域
本发明涉及农业和植物生物技术等领域,特别是在分子水平上进行水稻遗传育种以及生理、基因功能等基础研究。
背景技术
叶片是植物进行光合作用的主要器官,类型丰富且易于鉴别,叶色变异是辨别植物突变最直观的性状之一。叶绿体是植物进行光合作用的场所,而叶绿体的发育受到一系列的核质互作基因的控制。研究表明控制叶绿体发育的基因被破坏可导致叶绿体发育受阻,进而使植物叶色发生异常,使光合作用效率下降,甚至植株死亡。目前,人们利用物理、化学、生物等诱变已得到水稻叶色突变体,将其应用于水稻的遗传育种、生理及其相关基因的克隆和功能研究。本研究利用经物理诱变得到的低温条件下水稻早期苗色突变体并通过图位克隆技术定位到一个受低温响应叶绿体发育的基因,至今尚未有与此水稻基因相关的文献报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一个受低温响应的早期水稻叶绿体发育基因、该基因编码的蛋白质及这个基因的检测方法和应用。
携带该基因的水稻在低温条件下早期水稻植株黄化,高温恢复绿色。
这种低温响应早期水稻叶绿体发育的基因,具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。优选的,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
该基因序列所编码的蛋白质,具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。优选的,该氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
一对用于检测受低温响应水稻叶绿体发育基因的特异性dCAPs PCR引物,其特征在于,其核苷酸序列:
上游:5' GATTCGATGAAGCTTATCGGATACTTGCGAAG 3'
下游:5' ATCCTTGGCATCACTGATACGG 3'
即SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示序列。
检测这种控制早期受低温响应水稻叶绿体发育基因的方法为,采用上述特异性dCAPs PCR引物对水稻植株所提取的DNA进行PCR扩增反应,由普通水稻(如嘉花1号)DNA扩增所得到的125bp片段,如SEQ ID No.3所示,能被MboⅡ酶切成33bp和92bp的两个特异性片段,而由携带该低温响应的叶绿体发育基因的水稻的DNA扩增得到的124bp长度,如SEQ>MboⅡ酶切断,根据DNA能否被MboⅡ酶切可快速检测到是否含有此基因的水稻品种。
水稻低温度响应叶色突变体材料是由粳稻“嘉花1号”经60Coγ射线辐照而来,经海南、上海两地多年自交加代和选择,已成为各种农艺性状稳定的品系。发明人在研究中将此突变品系与籼稻“广占63S”配制杂交组合,构建遗传群体,利用SSR和InDel分子标记将控制叶绿体发育的基因定位在水稻的第10号染色体。
本发明控制低温响应叶绿体发育的基因本研究首先利用RNA干扰(RNAi)法验证水稻叶绿体发育相关基因的功能,通过构建pTCK303二元载体,转入农杆菌,再侵染野生型水稻嘉花1号的愈伤经分化获得突变体基因的RNAi苗,来验证基因功能,其RNAi植株叶色变黄(如图4),同样,利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术也验证了普通水稻(野生型)中的该等位基因的被破坏即可导致早期水稻叶绿体发育受阻,使植株黄化。
本发明得到的控制低温响应早期水稻叶绿体发育的基因可应用于杂交水稻制种,该基因导入杂交水稻不育系可提高不育系自身以及由它配制杂交水稻的纯度。
附图说明
图1 为20℃条件下含有苗期低温响应叶绿体发育的基因水稻与野生型水稻对照图,其中左侧为含有苗期低温响应叶绿体发育的基因水稻,右侧为野生型水稻。
图2 为32℃条件下含有苗期低温响应叶绿体发育的基因水稻与野生型水稻对照图,其中左侧为含有苗期低温响应叶绿体发育的基因水稻,右侧为野生型水稻。
图3为本发明对PCR扩增产物进行MboⅡ酶切检测结果。T1代表野生型水稻酶切检测结果;T2代表含有低温响应叶绿体发育的基因酶切检测结果。
图4为野生型、RNAi的T1代苗与苗期低温响应叶绿体发育的基因水稻对比图,其中左侧为野生型水稻、中间为RNAi的T1代苗期水稻,右侧为苗期低温响应叶绿体发育的基因水稻。
图5为野生型与CRISPR/Cas9基因组编辑技术敲除的苗对比图,其中左侧为野生型水稻,右侧为CRISPR/Cas9基因组编辑技术敲除的苗期水稻。
具体实施方式:
实施例1:水稻DNA提取(CTAB法提取模板DNA)
1.取1.0g水稻叶片,然后加液态N2研磨成粉末状,迅速转移到2.0>
2.将步骤1得到的溶液放置60℃水浴40分钟,每隔10min轻轻震荡4~6次,冷却至室温后,12000 r/min离心5min;
3.小心吸取上清液600ul倒入新的2.0 ml Eppendorf管,再加入相同体积的异戊醇:氯仿(1:24)溶液,充分混匀,12000 r/min离心5min;
4.小心吸取上清加入1.5 ml Eppendorf管,加入三分之二体积的异戊醇混匀,12000r/min离心5min;
5.弃上清,加入70%乙醇清洗DNA约1-2次,12000 r/min离心5min;
6.弃上清,室温晾干或者40℃恒温箱烘干,加ddH2O溶解,4℃保存备用。
实施例2:PCR扩增和基因检测
总体积为50ul的PCR反应体系:
再使用Eppendorf PCR扩增仪进行扩增。PCR反应程序:
实施例3:检测获得低温响应早期水稻叶绿体发育的基因
1、 25 μL PCR反应体系如下:100mM Tris-HCl pH9.0;100mM KCl; 20mM MgSO4;80mM(NH4)2SO4;2.5>Taq酶,1μl模板DNA/10μl。
引物序列为:
上游:5' GATTCGATGAAGCTTATCGGATACTTGCGAAG 3'
下游:5' ATCCTTGGCATCACTGATACGG 3'
2、酶切反应体系:22.5μl无菌水;20μl的PCR产物;5μl的10×MboⅡbuffer;2.5μl的MboⅡ酶。
3、将酶切反应体系混匀后,放入37℃恒温水浴中,温浴3小时,每管加入3μl的10×Loading buffer终止酶切反应。将酶切产物上样与1%琼脂糖凝胶上并进行电泳,最后经溴化乙锭染色后在UVP凝胶成像仪上成像,结果如图3。
实施例4:基因功能验证
水稻低温响应叶色突变体材料tcd10来源于粳稻嘉花1号经>60Coγ射线诱变产生。经测序发现,突变型基因(TCD10)(SEQ>tcd10突变体在低温条件下早期植株黄化。另外,RNAi技术和CRISPR/Cas9基因组编辑技术实验结果,都表明普通水稻中的该等位基因(TCD10)的突变体后代都能使水稻叶色呈低温条件下黄化表型。
1、利用SSR和InDel分子标记进行突变基因的定位,通过测序和利用实时荧光定量PCR技术(Real Time qPCR)对叶绿体发育、叶绿素合成以及光合作用相关基因进行RNA水平的表达量的分析,其RNA水平的表达量下降,这说明该基因影响低温条件下质体早期发育相关基因的表达,导致质体发育受阻,进而影响了叶绿体发育和光合色素的累积。
2、本发明主要利用RNA干扰(RNAi)法验证一个水稻叶绿体发育相关基因的功能,通过构建pTCK303二元载体,转入农杆菌,再侵染野生型水稻嘉花1号的愈伤经分化获得突变体基因的RNAi苗,来验证基因功能。
3、本发明利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术即由RNA指导Cas蛋白对靶向基因进行修饰的技术对普通水稻中的该等位基因进行了敲除,得到了T1代低温白化植株(如图5),也证实普通水稻(野生型)中的该等位基因(TCD10)的被破坏即可导致低温条件早期水稻叶绿体发育受阻,使植株黄化。
5、携带该基因的水稻在低温条件下苗期叶色呈黄化表型,高温下又恢复正常,因此可以通过此表型变化来鉴别水稻品种真伪,提高纯度。
序列表
SEQUENCE LISTING
<110>上海师范大学
<120> 一个受低温响应的早期水稻叶绿体发育基因及其检测方法和应用
<130>none
<160>6
<170>PatentIn version 3.3
<210>1
<211>3789
<212>DNA
<213>水稻
<400>1
1 AAAAAAAATATCTCCCGTCTCCACTCCACTCCTTGCGCCATCTCGCGGCTGAACAGGGGA
61GTGGAGGGGAGGGCCGCCTATCTCCATCTGGCGAGCAGAGCAAGAGCAAGGGAGGGGATC
121 CTGGTGTGGTGAGCATCCACATCCTCTTCCTGATTCATCTCTCTCTCTCCCACCGGGACT
181 ACTTTTGCCTGGAATTTGCTTTGCTTTCGTTAAGCTCCTCTCTTAATTTCCGATACTTAA
241 CCTTAATACAAGTAGTAACAGTTTGTTTGTTCGTCTCAAGTTGGATTCTCGCTGATGTTT
301 CTTGAAATTCTCTCAGTTTCTTGGTGCTTCTTGGGAATTTTTCAGGTGTTGTTGTTGTCG
361 TTGTTGCTCGCCGGATGTTGGAGGTCTGCTGCTGCTCCGGCGTCCTCGGCGGGTCGCCGC
421 CGTCGTCGAGGACTGCGGGGGTTTCCTCACCTGGACTATCGCCGTCTCGGCCCAGTAAGC
481 GGCGAATCGGCCGCGCCCGGGTGCAGCCGCGCGCGCCGCCGCCGTGCGACGAGCGGAGGG
541 CGGCGGAGGACGTCATCCACGCGCTCAGGTCGGCGGATGGCCCCGCCGAGGCGCTTGAGC
601 GGTTCAGGTCGGCGGCGCGGAAGCCCAGGGTGGCCCACACGACCGCGTCGTGCAACTACA
661 TGCTCGAGCTCATGCGCGGCCATGGCCGGGTCGGGGACATGGCCGAGGTGTTCGACGTAA
721 TGCAGAGGCAGATCGTCAAGGCGAACGTGGGCACGTTCGCGGCGATCTTCGGAGGGCTTG
781 GTGTGGAGGGGGGACTCCGGAGCGCGCCGGTGGCGCTGCCGGTCATGAAGGAGGCCGGGA
841 TTGTCTTGAACGCGTACACGTATAATGGCCTGGTTTATTTCCTTGTGAAGTCCGGGTTTG
901 ATAGGGAGGCGTTGGAGGTTTATAGGGTGATGATGGTGGATGGTGTTGTGCCTAGTGTGA
961 GAACCTACTCTGTGCTGATGGTGGCGTTCGGGAAGAGGAGGGATGTCGAGACGGTTCTTT
1021GGTTGTTGCGTGAAATGGAGGCTCATGGCGTGAAGCCGAATGTGTATAGCTACACCATCT
1081GTATTCGAGTTCTTGGACAAGCCAAAAGATTCGATGAAGCTTATCGGATACTTGCGAAAT
1141GGAGAATGAAGGGTGTAAGCCGGATGTCATTACCCATACCGTGCTTATACAGGTTCTTTG
1201CGATGCTGGCCGTATCAGTGATGCCAAGGATGTTTTTTGGAAGATGAAGAAGAGTGATCA
1261AAAACCTGATCGAGTGACCTACATTACTCTGTTAGATAAGTTTGGTGACAATGGTGACTC
1321GCAATCAGTGATGGAAATCTGGAATGCAATGAAAGCTGATGGGTACAATGACAATGTTGT
1381TGCTTATACAGCAGTTATTGATGCATTGTGCCAAGTTGGGAGGGTCTTTGAAGCTTTGGA
1441AATGTTTGATGAGATGAAACAAAAGGGTATAGTGCCTGAGCAGTATTCATACAACTCGCT
1501GATATCGGGGTTTCTTAAAGCTGATAGATTTGGTGATGCCTTAGAGCTGTTTAAACATAT
1561GGATATTCATGGACCTAAACCAAATGGTTACACACATGTTCTTTTCATAAATTACTATGG
1621AAAATCTGGTGAATCTATAAAGGCAATACAGAGATATGAACTAATGAAGAGCAAAGGGAT
1681TGTGCCAGATGTTGTTGCTGGTAATGCTGTTTTGTTTGGTCTTGCCAAATCTGGTAGACT
1741TGGCATGGCAAAAAGGGTATTTCATGAATTAAAAGCTATGGGGGTTTCTCCGGATACTAT
1801CACCTACACTATGATGATCAAGTGTTGCAGCAAGGCATCAAAATTTGATGAAGCTGTGAA
1861GATTTTCTATGATATGATTGAAAATAATTGTGTTCCTGATGTTCTTGCCGTGAATTCTTT
1921GATTGATACACTCTACAAGGCAGGCAGGGGTGATGAAGCCTGGCGGATCTTTTATCAACT
1981AAAAGAAATGAATCTAGAGCCAACAGATGGGACTTACAATACACTTTTGGCAGGATTGGG
2041AAGGGAAGGTAAAGTCAAGGAGGTAATGCATCTGCTTGAAGAAATGTACCACAGTAATTA
2101TCCTCCTAATTTGATAACATACAATACGATTCTTGACTGTCTCTGCAAGAACGGGGCAGT
2161TAATGATGCACTTGATATGCTATACAGTATGACTACGAAAGGATGCATACCTGATCTTTC
2221GTCTTACAACACTGTTATATATGGCCTTGTTAAAGAAGAAAGATATAATGAGGCATTCAG
2281TATTTTTTGTCAGATGAAGAAGGTTCTTATTCCAGATTATGCAACACTGTGTACTATCCT
2341CCCAAGTTTTGTGAAAATTGGACTGATGAAGGAAGCTCTGCATATTATCAAGGACTACTT
2401CCTCCAACCTGGCTCCAAAACAGATAGGTCTTCATGCCATTCACTAATGGAAGGGATACT
2461GAAGAAGGCTGGCATCGAAAAGTCAATTGAGTTTGCTGAAATCATAGCATCAAGTGGTAT
2521TACCTTGGATGATTTCTTTTTGTGCCCATTAATTAAGCATCTCTGTAAGCAGAAGAAAGC
2581TCTTGAAGCACATGAACTTGTCAAAAAGTTCAAGAGCTTTGGAGTTTCACTAAAAACTGG
2641ATTATATAATTCTTTGATTTGTGGGCTTGTTGATGAAAACCTAATAGATATTGCTGAAGG
2701CTTGTTTGCTGAAATGAAGGAACTCGGTTGTGGTCCAGATGAGTTTACTTACAACTTACT
2761TCTTGATGCCATGGGAAAGTCAATGCGGATAGAGGAAATGCTAAAAGTTCAAGAAGAGAT
2821GCATCGCAAGGGATATGAATCAACTTATGTTACTTATAACACAATCATTTCAGGTCTTGT
2881AAAGTCAAGAAGGTTGGAGCAGGCTATTGATTTGTACTACAACCTGATGAGCCAAGGTTT
2941CTCACCCACACCATGCACATATGGCCCTCTTCTTGATGGTCTGTTAAAAGCTGGAAGGAT
3001AGAAGATGCAGAAAATCTTTTCAATGAGATGCTGGAGTATGGATGCAAGGCCAATTGCAC
3061TATCTACAATATACTACTGAATGGACATCGAATAGCTGGTAATACAGAGAAGGTCTGTCA
3121TTTGTTTCAGGATATGGTTGACCAGGGAATAAACCCAGATATAAAATCCTACACGATTAT
3181TATTGACACACTCTGCAAGGCAGGACAGTTAAATGATGGTCTAACATATTTTAGGCAATT
3241ATTAGAAATGGGTCTTGAACCTGATCTAATTACTTACAATTTGCTCATTGATGGTCTTGG
3301AAAATCAAAAAGATTAGAGGAAGCAGTGTCTCTATTCAATGAGATGCAGAAGAAGGGAAT
3361TGTCCCGAACTTGTACACTTATAATTCACTAATTCTCCACTTAGGAAAAGCAGGGAAGGC
3421TGCTGAAGCTGGGAAAATGTATGAAGAGCTACTGACGAAAGGCTGGAAGCCTAACGTTTT
3481CACATATAACGCTCTTATTAGGGGGTACAGTGTTTCCGGCAGTACTGATAGTGCCTATGC
3541TGCCTATGGTCGGATGATTGTTGGCGGGTGCCTACCCAATTCAAGCACGTACATGCAGCT
3601CCCAAATCAGCTGTGACTAACTAGTTAGTGACTGAATGTACTTCTTCTGTATAGTTTTGT
3661CTATAAAAGGAAAAGGATCAACTGTAGATAGTCCACTTCAATATATCTGAGGGTTCTGCT
3721GGTTCTTGTTCTACACTATATTTTTGTACTTGATGGAAGAAAATTATTCAATACACAGCT
3781GACTTGATC
<210>2
<211>1020
<212>PRT
<213>水稻
<400>2
Met Leu Glu Val Cys Cys Cys Ser Gly Val Leu Gly Gly Ser Pro Pro
1 5 1015
Ser Ser Arg Thr Ala Gly Val Ser Ser Pro Gly Leu Ser Pro Ser Arg
202530
Pro Ser Lys Arg Arg Ile Gly Arg Ala Arg Val Gln Pro Arg Ala Pro
354045
Pro Pro Cys Asp Glu Arg Arg Ala Ala Glu Asp Val Ile His Ala Leu
505560
Arg Ser Ala Asp Gly Pro Ala Glu Ala Leu Glu Arg Phe Arg Ser Ala
65707580
Ala Arg Lys Pro Arg Val Ala His Thr Thr Ala Ser Cys Asn Tyr Met
859095
Leu Glu Leu Met Arg Gly His Gly Arg Val Gly Asp Met Ala Glu Val
100 105 110
Phe Asp Val Met Gln Arg Gln Ile Val Lys Ala Asn Val Gly Thr Phe
115 120 125
Ala Ala Ile Phe Gly Gly Leu Gly Val Glu Gly Gly Leu Arg Ser Ala
130 135 140
Pro Val Ala Leu Pro Val Met Lys Glu Ala Gly Ile Val Leu Asn Ala
145 150 155 160
Tyr Thr Tyr Asn Gly Leu Val Tyr Phe Leu Val Lys Ser Gly Phe Asp
165 170 175
Arg Glu Ala Leu Glu Val Tyr Arg Val Met Met Val Asp Gly Val Val
180 185 190
Pro Ser Val Arg Thr Tyr Ser Val Leu Met Val Ala Phe Gly Lys Arg
195 200 205
Arg Asp Val Glu Thr Val Leu Trp Leu Leu Arg Glu Met Glu Ala His
210 215 220
Gly Val Lys Pro Asn Val Tyr Ser Tyr Thr Ile Cys Ile Arg Val Leu
225 230 235 240
Gly Gln Ala Lys Arg Phe Asp Glu Ala Tyr Arg Ile Leu Ala Lys Trp
245 250 255
Arg Met Lys Gly Val Ser Arg Met Ser Leu Pro Ile Pro Cys Leu Tyr
260 265 270
Arg Phe Phe Ala Met Leu Ala Val Ser Val Met Pro Arg Met Phe Phe
275 280 285
Gly Arg Arg Arg Val Ile Lys Asn Leu Ile Glu Pro Thr Leu Leu Cys
290 295 300
Ile Ser Leu Val Thr Met Val Thr Arg Asn Gln Trp Lys Ser Gly Met
305 310 315 320
Gln Lys Leu Met Gly Thr Met Thr Met Leu Leu Leu Ile Gln Gln Leu
325 330 335
Leu Met His Cys Ala Lys Leu Gly Gly Ser Leu Lys Leu Trp Lys Cys
340 345 350
Leu Met Arg Asn Lys Arg Val Cys Leu Ser Ser Ile His Thr Thr Arg
355 360 365
Tyr Arg Gly Phe Leu Lys Leu Ile Asp Leu Val Met Pro Ser Cys Leu
370 375 380
Asn Ile Trp Ile Phe Met Asp Leu Asn Gln Met Val Thr His Met Phe
385 390 395 400
Phe Ser Ile Thr Met Glu Asn Leu Val Asn Leu Arg Gln Tyr Arg Asp
405 410 415
Met Asn Arg Ala Lys Gly Leu Cys Gln Met Leu Leu Leu Val Met Leu
420 425 430
Phe Cys Leu Val Leu Pro Asn Leu Val Asp Leu Ala Trp Gln Lys Gly
435 440 445
Tyr Phe Met Asn Lys Leu Trp Gly Phe Leu Arg Ile Leu Ser Pro Thr
450 455 460
Leu Ser Ser Val Ala Ala Arg His Gln Asn Leu Met Lys Leu Arg Phe
465 470 475 480
Ser Met Ile Leu Lys Ile Ile Val Phe Leu Met Phe Leu Pro Ile Leu
485 490 495
Leu Ile His Ser Thr Arg Gln Ala Gly Val Met Lys Pro Gly Gly Ser
500 505 510
Phe Ile Asn Lys Lys Ile Ser Gln Gln Met Gly Leu Thr Ile His Phe
515 520 525
Trp Gln Asp Trp Glu Gly Lys Val Lys Ser Arg Arg Cys Ile Cys Leu
530 535 540
Lys Lys Cys Thr Thr Val Ile Ile Leu Leu Ile His Thr Ile Arg Phe
545 550 555 560
Leu Thr Val Ser Ala Arg Thr Gly Gln Leu Met Met His Leu Ile Cys
565 570 575
Tyr Thr Val Leu Arg Lys Asp Ala Tyr Leu Ile Phe Arg Leu Thr Thr
580 585 590
Leu Leu Tyr Met Ala Leu Leu Lys Lys Lys Asp Ile Met Arg His Ser
595 600 605
Val Phe Phe Val Arg Arg Arg Phe Leu Phe Gln Ile Met Gln His Cys
610 615 620
Val Leu Ser Ser Gln Val Leu Lys Leu Asp Arg Lys Leu Cys Ile Leu
625 630 635 640
Ser Arg Thr Thr Ser Ser Asn Leu Ala Pro Lys Gln Ile Gly Leu His
645 650 655
Ala Ile His Trp Lys Gly Tyr Arg Arg Leu Ala Ser Lys Ser Gln Leu
660 665 670
Ser Leu Leu Lys Ser His Gln Val Val Leu Pro Trp Met Ile Ser Phe
675 680 685
Cys Ala His Leu Ser Ile Ser Val Ser Arg Arg Lys Leu Leu Lys His
690 695 700
Met Asn Leu Ser Lys Ser Ser Arg Ala Leu Glu Phe His Lys Leu Asp
705 710 715 720
Tyr Ile Ile Leu Phe Val Gly Leu Leu Met Lys Thr Ile Leu Leu Lys
725 730 735
Ala Cys Leu Leu Lys Arg Asn Ser Val Val Val Gln Met Ser Leu Leu
740 745 750
Thr Thr Tyr Phe Leu Met Pro Trp Glu Ser Gln Cys Gly Arg Lys Cys
755 760 765
Lys Phe Lys Lys Arg Cys Ile Ala Arg Asp Met Asn Gln Leu Met Leu
770 775 780
Leu Ile Thr Gln Ser Phe Gln Val Leu Ser Gln Glu Gly Trp Ser Arg
785 790 795 800
Leu Leu Ile Cys Thr Thr Thr Ala Lys Val Ser His Pro His His Ala
805 810 815
His Met Ala Leu Phe Leu Met Val Cys Lys Leu Glu Gly Lys Met Gln
820 825 830
Lys Ile Phe Ser Met Arg Cys Trp Ser Met Asp Ala Arg Pro Ile Ala
835 840 845
Leu Ser Thr Ile Tyr Tyr Met Asp Ile Glu Leu Val Ile Gln Arg Arg
850 855 860
Ser Val Ile Cys Phe Arg Ile Trp Leu Thr Arg Glu Thr Gln Ile Asn
865 870 875 880
Pro Thr Arg Leu Leu Leu Thr His Ser Ala Arg Gln Asp Ser Met Met
885 890 895
Val His Ile Leu Gly Asn Tyr Lys Trp Val Leu Asn Leu Ile Leu Leu
900 905 910
Thr Ile Cys Ser Leu Met Val Leu Glu Asn Gln Lys Asp Arg Lys Gln
915 920 925
Cys Leu Tyr Ser Met Arg Cys Arg Arg Arg Glu Leu Ser Arg Thr Cys
930 935 940
Thr Leu Ile Ile His Phe Ser Thr Glu Lys Gln Gly Arg Leu Leu Lys
945 950 955 960
Leu Gly Lys Cys Met Lys Ser Tyr Arg Lys Ala Gly Ser Leu Thr Phe
965 970 975
Ser His Ile Thr Leu Leu Leu Gly Gly Thr Val Phe Pro Ala Val Leu
980 985 990
Ile Val Pro Met Leu Pro Met Val Gly Leu Leu Ala Gly Ala Tyr Pro
995 1000 1005
Ile Gln Ala Arg Thr Cys Ser Ser Gln Ile Ser Cys
1010 1015 1020
<210>3
<211>125
<212>DNA
<213>水稻
<400>3
GATTCGATGAAGCTTATCGGATACTTGCGAAAATGGAGAATGAAGGGTGTAAGCCGGATGTCATTACCCATAC
CGTGCTTATACAGGTTCTTTGCGATGCTGGCCGTATCAGTGATGCCAAGGAT
<210>4
<211>124
<212>DNA
<213>水稻
<400>4
GATTCGATGAAGCTTATCGGATACTTGCGAAATGGAGAATGAAGGGTGTAAGCCGGATGTCATTACCCATACC
GTGCTTATACAGGTTCTTTGCGATGCTGGCCGTATCAGTGATGCCAAGGAT
<210>5
<211>32
<212>DNA
<213>人工序列
<400> 5
GATTCGATGA AGCTTATCGG ATACTTGCGA AG
<210>6
<211>22
<212>DNA
<213>人工序列
<400>6
ATCCTTGGCA TCACTGATAC GG
机译: 在早期胚胎发育过程中,通过过表达相关基因的生长和/或发育相关基因,通过转基因提高了种子大小和种子数量
机译: 在早期胚胎发育过程中,通过过表达相关基因的生长和/或发育相关基因,通过转基因提高了种子大小和种子数量
机译: 在早期胚胎发育过程中,通过过表达相关基因的生长和/或发育相关基因,通过转基因提高了种子大小和种子数量