通过检测三期结直肠肿瘤患者血清预测肿瘤患者预后

摘要

本发明涉及RNATES、MIP-1b、IFN-g的新用途，可通过检测三期结直肠肿瘤患者血清中RNATES、MIP-1b、IFN-g水平预测肿瘤患者预后。其优点表现在：本发明第一次证明通过检测患者血清中RNATES、MIP-1b、IFN-g的水平可以预测三期结直肠癌患者的预后状态。

说明书

技术领域

本发明涉及结直肠癌技术领域，具体地说，是通过检测三期结直肠肿瘤患 者血清中RNATES、MIP-1b、IFN-g水平预测肿瘤患者预后。

背景技术

结直肠肿瘤是常见的恶性肿瘤之一，发病率在男女中都很高，在全球肿瘤 死亡病例中位居第四位。目前，三期肠癌患者是指初次诊断时患者即有淋巴结 的转移，对于三期肠癌病人，手术切除和辅助放化疗是标准的治疗方案，然而 仍然有四分之一的三期肠癌患者接受了标准的治疗之后，仍然出现了复发和远 处转移的情况。

影响肠癌患者预后的因素有很多，很多研究表明免疫系统失衡可以影响患 者的预后。最近，很多研究表明，免疫因子在调节肿瘤患者的化疗敏感性上起 到了重要作用。趋化因子是一类小分子多肽，肿瘤微环境中的趋化因子一般是 肿瘤细胞自身分泌的或者是被招募而来，越来越多的证据表明，肿瘤微环境中 趋化因子的聚集跟抗肿瘤的免疫反应相关。肿瘤细胞的增值、侵袭和转移都受 到趋化因子的调节。趋化因子可以在患者的外周血中检测到，因此，检测患者 外周血中趋化因子的浓度是潜在预测肿瘤患者预后的手段。

目前，已经有研究表明IL-6(白细胞趋化因子6)、IL-10和VEGF(血管生 长因子)的血清水平是反应结直肠肿瘤患者预后的一个重要指标，我们团队前 期的工作也发现IL-22的在患者血清和肿瘤组织中的水平都与结直肠肿瘤患者 的化疗抵抗以及总体生存率相关。

然而，以前的研究都是基于一个或者很少几个因子的检测，本次试验运用 更加先进的高通量Luminex200技术，这个技术一次试验可以同时检测40多个 细胞因子的表达水平，与传统的酶联免疫吸附试验(ELISA)相比，这种技术 需要的临床样本更少，结果更加精确可信。虽然，已经有人用这个方法在病人 血清中进行过试验，也得出一些跟预后相关的细胞因子，但是，专门针对三期 结直肠癌病人的试验，目前没有人进行研究，我们是第一家。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供RNATES、MIP-1b、IFN-g 的新用途。

本发明的再一的目的是，提供一种筛选预测三期结直肠肿瘤患者预后的细 胞因子的方法。

本发明的另一的目的是，提供一种治疗三期结直肠肿瘤的药物。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：RNATES、MIP-1b、IFN-g 在制备预测三期结直肠肿瘤患者预后的试剂中的应用。

所述的试剂检测三期结直肠肿瘤患者血清中RNATES、MIP-1b或IFN-g 的水平。

一种预测三期结直肠肿瘤患者预后的试剂盒，所述的试剂盒检测三期结直 肠肿瘤患者血清中RNATES、MIP-1b或IFN-g的水平。

一种检测方法，所述的方法检测三期结直肠肿瘤患者血清中RNATES、 MIP-1b或IFN-g的水平。

一种预测三期结直肠肿瘤患者预后评分的方法，所述的方法检测三期结直 肠肿瘤患者血清中RNATES、MIP-1b或IFN-g的水平，并根据RNATES、MIP-1b 或IFN-g的水平进行评分。

为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：一种筛选预测三期结 直肠肿瘤患者预后的细胞因子的方法，所述的方法检测病人血液中细胞因子的 浓度情况，根据最小P值法确定每个细胞因子的cutoff值，然后根据cutoff值 将病人分为高表达组和低表达组，接着运用Graphpad作图软件分析两组之间 的生存差异，从而判断不同细胞因子对患者预后的影响。

所述的方法使用45因子Luminex200试剂盒检测病人血液中45个细胞因 子的浓度情况。

为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：治疗结直肠肿瘤的药 物，所述的药物能够提高结直肠肿瘤患者血清中RNATES、MIP-1b水平或降 低结直肠肿瘤患者血清中IFN-g水平。

本发明优点在于：

本发明第一次证明通过检测患者血清中RNATES、MIP-1b、IFN-g的水平 可以预测三期结直肠癌患者的预后状态。

附图说明

附图1是MIP-1b多因素cox回归分析的结果。

附图2是IFN-g多因素cox回归分析的结果。

附图3是RNATES多因素cox回归分析的结果。

具体实施方式

下面结合附图对本发明提供的具体实施方式作详细说明。

实施例1

试验方法

病人：

连续收集了从2010年到2012年间在新华医院结直肠肛门疾病外科进行手 术治疗的357例三期肠癌病人的血清，在这357例病人中其中323例病人有完 整的2年DFS随访资料。

方法

应用Ebioscience公司的45因子Luminex200试剂盒，检测病人血液中45 个细胞因子的浓度情况，根据ROC曲线确定每个细胞因子的cutoff值，然后 根据cutoff值将病人分为高表达组和低表达组，接着运用graphpad作图软件分 析两组之间的生存差异，从而判断不同细胞因子对患者预后的影响。

结果：

运用单因素cox回归分析发现IFN-r、IL-8、IL-10、VEGFA、MIP-1a、MIP-1b、 RNATES、LIF、EOTAXIN、IP10、PIGF、NGF、HGF、VEGFD、CA199、TNFa、 GMCSF 17个细胞因子是影响结直肠癌患者预后的独立危险因素(表1)，然后 运用多因素cox回归分析发现RNATES、MIP-1b、IFN-g仍然是影响患者预后 的因素，与患者的DFS密切相关(图1，2，3)。

结论：

本项发明第一次证明通过检测患者血清中RNATES、MIP-1b、IFN-g的水 平可以预测三期结直肠癌患者的预后状态。

表1

Factors HR 95％CL 95％CL p IFN-r 3.537 2.033 6.155 0 IL-18 2.903 1.643 5.13 0 IL-10 3.165 1.825 5.491 0 VEGFA 3.813 2.142 6.78 0

MIP-1a 3.189 1.812 5.61 0 MIP-1b 5.098 2.398 10.83 0 RNATES 2.568 1.484 4.444 0.001 LIF 2.4 1.366 4.215 0.002 eotaxin 2.68 1.327 5.4 0.006 IP10 2.455 1.3 4.635 0.006 PlGF 2.113 1.224 3.642 0.007 NGF 2.455 1.26 4.78 0.008 HGF 2.054 1.185 3.56 0.01 VEGFD 1.925 1.123 3.3 0.017 CA199 1.003 1 1.0005 0.023 TNFa 1.787 1.039 3.072 0.036 GMCSF 1.826 1.034 3.22 0.038 EGF 0.253 0.61 1.04 0.057 age 1.026 0.999 1.053 0.06 SCF 1.68 0.979 2.884 0.06 MCP1 0.484 0.217 1.01 0.075 CEA 1.0001 1 1.0002 0.101 IL-13 1.541 0.901 2.635 0.11 CA724 1.003 0.995 1.011 0.449 Nstage 1.12253 0.652024 1.933 0.676674 gender 1.126 0.628 2.019 0.691

实施例2

检测患者血清中RNATES、MIP-1b或IFN-g的水平预测三期结直肠癌患 者的预后状态的试剂、试剂盒或检测方法等。

特别地，所述的试剂、试剂盒或检测方法同时检测RNATES、MIP-1b和 IFN-g的水平。

实施例3

能够提高结直肠肿瘤患者血清中RNATES、MIP-1b水平或降低结直肠肿 瘤患者血清中IFN-g水平的药物或许能够提高三期结直肠肿瘤患者的生存率， 甚至治疗结直肠肿瘤。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通 技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些 改进和补充也应视为本发明的保护范围。