基于锁核酸修饰的阻滞物进行阻滞取代扩增富集检测目标突变的方法

摘要

本发明涉及一种利用锁核酸修饰对目标区域基因突变进行富集和检测的方法。该富集方法包括：将含有待检测目标区域的核酸样本和第一引物、第二引物和阻滞扩增序列混合扩增，获得第一扩增产物；基于第一扩增产物利用第一引物、第三引物扩增获得第二扩增产物；阻滞扩增序列的3’末端含有阻滞基团，阻滞扩增序列和第一引物含有部分重叠序列，所述待检测目标区域位于阻滞扩增序列与核酸样本的匹配区域内，第一引物的3’末端位于所述待检测目标区域的上游，所述阻滞扩增序列上修饰有锁核酸，携带有所述锁核酸的碱基位于与所述待检测目标区域匹配的位置。由此可以实现对于低频基因突变的高精度检测。