滇重楼及毛重楼植物的种子萌发方法

摘要

滇重楼及毛重楼萌发方法，选择当年采收滇重楼（P.yunnanensis）及毛重楼（P.mairei）种子，经洗净后的粗河沙揉搓去除假种皮，恒温震荡浸泡于20℃水中，浸泡时间不超过24小时，每两小时换水一次，将浸泡后的重楼种子同基质拌匀后，均匀洒在筐底铺上5cm的栽培基质为体积比的草煤土:腐殖土:珍珠岩=1:1:1的播种筐中，上面覆盖一层不超过1cm的基质，保证种子不暴露在空气中，将播种筐放入盛水水槽中，使水分反向渗透直至浸润整筐播种基质，后取出播种筐控水，将控水后的播种筐放入恒温培养室内培养，温度20±1℃；播种基质应定期浇水保湿，湿度控制在30%-40%，50-60天后发芽率可达70%以上。

说明书

所属领域：

本发明属于生物技术领域，具体地，涉及两种重楼属植物滇重楼（P. yunnanensis）及毛重楼（P.mairei）的快速萌发方法。

背景技术：

重楼是延龄草科(Trilliaceae)重楼属(Paris)植物的统称。重楼属植物全世界 共有24种，国外主要分布于欧洲大陆的热带及寒温带地区，我国有19种主要 分布于云、贵、川等地。作为名贵的药用植物，其根茎中含有的甾体化合物，具 有止血、消炎、镇痛等功效，是“云南白药”、“宫血宁”等著名中成药的主要原料 之一。云南省气候资源丰富，有热带、亚热带、温带、寒带等各种气候类型；地 形复杂，有河谷、盆地、丘陵、山地、高原等。各种地形交错分布，土壤类型复 杂，为植物提供了生长、演化的多样性的生态条件，是我国重楼资源的主要分布 地之一。重楼属植物在云南分布广泛，昆明、昭通、曲靖、文山、红河、大理、 丽江、保山、怒江等地均有分布。分布海拔从700m-3000m不等，分布地年平 均气温15度左右，年降水量650mm-1600mm不等，最高可达2000mm（怒江 地区）。重楼属植物种子萌发休眠期长，打破休眠困难，发芽率低，常规种植方 法从播种至药材采收往往需要七年左右时间，现有技术报道的种子萌发的方法往 往需要4个月以上，极大程度的限制了重楼资源的发展利用，亦使得野外盗挖成 为了获得该资源的主要渠道。近年来由于对重楼资源需求量逐渐上涨，野生重楼 缺乏保护，遭到掠夺式采挖，一些分布地已经很难见到重楼的野生群落。通过该 技术，可以实现重楼种子的快速萌发，大大缩短了其自然生长周期，降低了栽培 成本，保护了野生资源，防止过度开采，为其可持续利用与发展提供物质基础、 科学依据与技术支持。

发明内容：

本发明的目的旨在提供一种方便快捷滇重楼及毛重楼快速萌发的技术。

本发明的目的是通过以下的技术方案得以实现的：

滇重楼及毛重楼萌发方法，选择当年采收的无病害无霉变重楼种子，去除假 种皮，浸泡，播种，恒温培养。

如所述的方法，选用洗净后的粗河沙拌种，揉搓至种子外层红色假种皮剥落。

如所述的方法，将去除假种皮后的种子恒温震荡浸泡于20℃水中，浸泡时 间不超过24小时，每两小时换水一次。

如所述的方法，播种是选择盛有播种基质的塑料筐，筐底铺上5cm的基质， 将浸泡后的重楼种子同基质拌匀后，均匀洒在播种筐中，上面覆盖一层不超过 1cm的基质，保证种子不暴露在空气中；将播种筐放入盛水水槽中，使水分反 向渗透直至浸润整筐播种基质，后取出播种筐控水，至没有大量水分渗出为止。

如所述的方法，将控水后的播种筐放入恒温培养室内培养，温度20±1℃； 播种基质应定期浇水保湿，湿度控制在30%-40%，50-60天后发芽率可达70% 以上。

如所述的方法，选取栽培基质播种，所述栽培基质是体积比为草煤土:腐制 殖土:珍珠岩=1:1:1。

如所述的方法，选择当年采收的无病害重楼种子，经粗河沙去除假种皮后， 20℃恒温震荡浸泡不超过24小时，每两小时换水一次，将浸泡后的重楼种子同 基质拌匀后，均匀洒在筐底铺有5cm、体积比为草煤土:腐殖土:珍珠岩=1:1:1的 播种基质中，上面覆盖一层不超过1cm的基质，保证种子不暴露在空气中，将 播种筐放入盛水水槽中，使水分反向渗透直至浸润整筐播种基质，后取出播种筐 控水，将控水后的播种筐放入恒温培养室内培养，温度20±1℃；播种基质定期 浇水保湿，湿度控制在30%-40%，50-60天后发芽率达70%。

本发明的方法可以更具体地归纳如下：选取当年采收的野生滇重楼及毛重楼 无病害种子，经洗净后的粗河沙拌种，揉搓至种子外层红色假种皮剥落（去除假 种皮后，滇重楼种子千粒重为27.22g，毛重楼种子千粒重为32.8g）。将去除假 种皮后的滇重楼及毛重楼种子各200g，按照50g一组进行分组，除50g对照外， 均恒温震荡浸泡于20℃水中，浸泡时间分别为12h、18h、24h，每2h换水一 次。选择盛有草煤土:腐殖土:珍珠岩=1:1:1的混合基质播种筐（长*宽*高 =60cm*40cm*10cm）进行播种，底层基质铺设厚度为5cm，将浸泡后的种子同 播种基质拌匀，均匀洒在播种筐中，上面覆盖一层不超过1cm的基质，保证种 子不暴露在空气中；将播种筐放入盛水水槽中，使水分反向渗透直至浸润整筐播 种基质，后取出播种筐控水，至没有大量水分渗出为止。将控水后的播种筐放入 恒温培养室内培养，温度20±1℃；播种基质应定期浇水保湿，湿度控制在 30%-40%，50-60天后观察萌发结果。

迄今，现有技术中涉及重楼属植物滇重楼及毛重楼快速萌发技术，其萌发时 间均长于本发明成果，本发明在萌发时间及萌发率结果表现上均优于现有技术。

具体实施方式：

下面用本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此来限 定本发明。

实施例1：

一、材料与方法：

试验于2012年12月-2013年12月在云南省丽江市沛丰园艺公司基地进行， 选取野生滇重楼种子进行播种实验。选取腐殖质土作为播种基质，经粗砂揉搓去 除重楼种子外红色假种皮后，播种至改良基质后的大田中，上覆遮阴网遮荫。在 自然条件下，经一年时间，观察重楼种子萌发情况。

二、结果与分析：

在12个月自然条件下，野生滇重楼萌发率仅为30%左右，主要由于秋季播 种，大部分种子很快进入休眠。故不经过快速萌发处理，在自然条件下播种，对 滇重楼种子萌发率存在一定制约。传统种植方法不能有效提高野生滇重楼资源的 利用与开发效率。

实施例2：

一、材料与方法：

试验于2012年10-12月在云南省丽江市沛丰园艺公司基地进行，选取当年 采收野生滇重楼及毛重楼健康无病害种子，经洗净后的粗河沙拌种，揉搓至种子 外层红色假种皮剥落（去除假种皮后，滇重楼种子千粒重为27.22g，毛重楼种 子千粒重为32.8g）。将去除假种皮后的滇重楼及毛重楼种子各200g，按照50g 一组进行分组，除50g对照外，均恒温震荡浸泡于20℃水中，浸泡时间分别为 12h、18h、24h，每6h换水一次。选择盛有草煤土:腐制殖土:珍珠岩=1:1:1的 混合基质播种筐（长*宽*高=60cm*40cm*10cm）进行播种，底层基质铺设厚度 为5cm，将浸泡后的种子同播种基质拌匀，均匀洒在播种筐中，上覆盖一层不 超过1cm的基质，保证种子不暴露在空气中；将播种筐放入盛水水槽中，使水 分反向渗透直至浸润整筐播种基质，后取出播种筐控水，至没有大量水分渗出为 止。将控水后的播种筐置于室内常温培养，室温保持在10-20℃之间；播种基质 定期浇水保湿，湿度控制在30%-40%，经90天后观察萌发结果。

二、结果与分析：

表1不同重楼种子在不同浸泡时间下萌发率比较（室温培养10-20℃）

由表1可以看出，不同浸泡时间对于重楼种子萌发有一定影响，浸泡时间过 短不能使内含物有效溶出，浸泡时间过长则可能导致种子缺氧而死亡。同样条件 下滇重楼的萌发率要高于毛重楼。

在人工条件下，由于室内培养温度没有进行严格控制，部分种子仍处于休眠 状态，且种子萌发周期较长，萌发率也没有达到预期效果。但本实施例说明了浸 泡时间对于重楼种子萌发存在一定影响。

实施例3：

一、材料与方法：

试验于2013年10-12月在云南省丽江市中国科学院昆明植物研究所丽江高 山植物园试验基地进行，选取当年采收野生滇重楼及毛重楼无病害种子，经洗净 后的粗河沙拌种，揉搓至种子外层红色假种皮剥落（去除假种皮后，滇重楼种子 千粒重为27.22g，毛重楼种子千粒重为32.8g）。将去除假种皮后的滇重楼及毛 重楼种子各200g，按照50g一组进行分组，除50g对照外，均恒温震荡浸泡于 20℃水中，浸泡时间分别为12h、18h、24h，每2h换水一次。选择盛有草煤土: 腐制殖土:珍珠岩=1:1:1的混合基质播种筐（长*宽*高=60cm*40cm*10cm）进行 播种，底层基质铺设厚度为5cm，将浸泡后的种子同播种基质拌匀，均匀洒在 播种筐中，上面覆盖一层不超过1cm的基质，保证种子不暴露在空气中；将播 种筐放入盛水水槽中，使水分反向渗透直至浸润整筐播种基质，后取出播种筐控 水，至没有大量水分渗出为止。将控水后的播种筐放入恒温培养室内培养，温度 20±1℃；播种基质应定期浇水保湿，湿度控制在30%-40%，50-60天后观察萌 发结果。

二、结果与分析：

表2不同培养时间下重楼种子经浸泡后萌发率比较（恒温培养20±1℃）

由表2可以看出，恒温培养的萌发率要大大超过室温培养，其萌发周期也大 大缩短，50天观测结果已经可以达到70%左右，60天后萌发率则更高。温度条 件在打破重楼种子休眠中起到了至关重要的作用，结合实施例二和实施例三可 知，在种子浸泡过程中，及时换水可以加速种子本身抑制萌发化学物质的有效溶 出，对种子萌发起到一定效果。在培养期间对播种基质保湿是必要的，因为云南 野生重楼种子萌发一般在雨季到来后，湿度条件是其萌发的一个关键因素，针对 透气性较好的播种基质，控制湿度在30-40%为宜。

本发明的优异效果主要体现在：

1、系统的分析了不同条件下滇重楼及毛重楼种子萌发的试验结果，筛选了 适宜该技术的最优萌发条件，并解释了该条件的优选原因。

2、针对两种重楼属植物种子休眠后不容易打破的现状，分析并指出选用当 年采收的种子，利用粗砂去除假种皮，浸泡溶出抑制性化学物质以及恒温定湿处 理的配套方法，解决了重楼种子进入休眠期较快，休眠期长，不宜萌发的关键性 问题。

3、现有技术虽然能从不同角度解决重楼种子萌发问题，但相对萌发周期较 长，萌发率不高，平均萌发周期均高于90d，本发明技术能够在现有技术基础上 有效缩短重楼种子萌发时间，50d即可达到70%以上萌发率，为生产以及资源 规模化利用大大缩减了时间成本，提高了效率。

4、重楼种子快速萌发技术的实现，对该野生道地药材的扩大繁殖，繁殖成 本的降低起到了至关重要的作用，同时保护野生资源，防止过度开采，为该野生 资源可持续利用与发展提供物质基础、科学依据与技术支持。