利用高效液相色谱法检测玉米细胞核DNA和线粒体DNA甲基化水平的方法

摘要

本发明公开了一种利用高效液相色谱法检测玉米细胞核DNA和线粒体DNA甲基化水平的方法，可供处理100份1μgDNA的水解混合液配制方法为：将250U Benzonase、300mU磷酸二酯酶I、200U碱性磷酸酶加入至5mL pH为7.9的Tris-HCl水解缓冲液内；流动相的pH：对于线粒体DNA，用磷酸调节pH至3.42；对于细胞核DNA，用磷酸调节pH至3.0；色谱条件为：色谱柱：C18填料色谱柱；流速：0.8mL/min，检测器波长：287nm；柱温：35℃；进样量：20μL；流动相：甲醇：5mM戊烷磺酸钠：三乙胺（10：90：0.2，V/V），并用磷酸调节pH分别至3.42和3.0。方法简单易行，20min内可将各组分完全分离。