摘要：在本实验中,首先考察了不同浓度外源锌离子对不同细胞株(MDAMB231、293T和HepG2)的细胞周期,凋亡及增殖的影响.实验结果表明,在10％ FBS,刺激时间为24 h的情况下,293T细胞的细胞周期对于外源锌的刺激最为敏感,大于100 μM的锌刺激就使得细胞处于G1期的数目增多,处于S期的数目减少.对于MDAMB231细胞来说,更高浓度的外源锌刺激才会引起其细胞周期的变化.但是外源锌对于HepG2细胞的周期影响却很小.同时,200μM的外源锌使得MDAMB231的凋亡比率显著上升,但是基本不影响293T和HepG2细胞株.此外,三种细胞株在增殖上对于外源锌刺激的响应也各不相同,而且同种细胞株在刺激时间为24 h与48 h时的情况也有差异.为了直观地研究细胞内自由锌离子在外源锌存在时的分布情况,将细胞用NBD-TPEA和Hoechst 33342染色,并使用激光共聚焦荧光显微镜观察,发现外源锌浓度越高,细胞质内的自由锌离子也越多.最后,RT-PCR技术研究表明,与锌转运相关的ZnT和ZIP家族的基因表达随着外源锌浓度的变化而变化,并与细胞周期,凋亡等的变化相符.
