摘要:目的:纳米银是应用最为广泛的纳米材料之一,在医药领域作为抗菌剂已大量投入使用.而纳米银是否具有不同于常规材料的潜在毒性,目前还没有充分的研究资料证实.有文献显示,纳米材料可透过血脑屏障进入神经系统,在脑组织中蓄积,表明纳米材料具有潜在的神经毒性.为了确定纳米银对神经细胞的影响,为纳米银的安全使用提供参考,本文选择原代培养的大鼠星形胶质细胞研究纳米银对大鼠脑神经细胞的毒性.rn 方法:建立大鼠原代星形胶质细胞培养方法,利用倒置荧光显微镜与激光共聚焦显微镜细胞形态进行观察。利用AB法测定细胞的存活率,利用染色和酶标免疫法测定细胞内GSH和ROS含量,利用TEM观察纳米银在细胞内的生物学分布。rn 结果:通过AB法对纳米银暴露后的细胞进行活力检测,结果发现10μg/ml纳米银即可引起细胞存活率的显著降低。细胞培养液中LDH含量未见显著变化,说明细胞膜完整性未受到显著损伤。利用TEM检测,发现细胞内有大量纳米银颗粒被吞噬,聚集在细胞的囊泡中。研究细胞内活性氧(ROS)水平,在暴露O.5h后细胞内的ROS水平显著升高,随后逐渐降低,50μg/ml的纳米银可引起细胞ROS过量表达至对照组的150%。说明纳米银可引起细胞内活性氧的积聚,造成细胞的氧化损伤。rn 结论:纳米银可穿过细胞膜进入原代星形胶质细胞中,引起细胞内ROS水平的升高,对细胞造成氧化损伤。这种损伤作用具有剂量依赖性。