异牛肝菌素对人肝癌细胞增殖、凋亡影响及其与PI3K/Akt通路的关系

摘要

目的观察异牛肝菌素对人肝癌细胞增殖、凋亡的影响,并基于磷脂酸肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路探讨相关作用机制。方法取对数生长期的人肝癌细胞株HepG2,分为异牛肝菌素组、激活剂组、对照组。异牛肝菌素组加入50μg/mL的异牛肝菌素;激活剂组加入50μg/mL的异牛肝菌素和20μg/mL的PI3K/Akt通路激活剂FumonisinB1;对照组仅加入等容量生理盐水,不加任何药物。采用MTT法测算各组干预后24、48、72 h细胞的增殖抑制率,采用Hoechst 333258荧光染色法测算细胞凋亡率,Westernblotting法检测细胞中的凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、Caspase-3)及PI3K/Akt通路相关蛋白(PI3K、pPI3K、pAkt)。结果干预后24、48、72 h异牛肝菌素组细胞OD值低于激活剂组和对照组,细胞增殖抑制率高于激活剂组和对照组(P均<0.05);随时间延长,异牛肝菌素组OD值呈降低趋势,细胞增殖抑制率呈升高趋势(P均<0.05)。异牛肝菌素组细胞凋亡率及Bax、Caspase-3蛋白表达高于激活剂组和对照组,Bcl-2、PI3K、pPI3K、pAkt蛋白表达低于激活剂组和对照组(P均<0.05)。结论异牛肝菌素可抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡,作用机制可能与抑制PI3K/Akt通路有关。