预先给予白藜芦醇苷对TGF-β1诱导生长小鼠肾足细胞株MPC5增殖的影响及其机制

摘要

cqvip:目的观察预先给予白藜芦醇苷对TGF-β1诱导生长小鼠肾足细胞株MPC5增殖的影响,并探讨其可能作用机制.方法将取MPC5细胞分为A、B、C、D组四组,A、B、C组分别加入100μmol/L白藜芦醇苷预处理24 h.预处理后,A组细胞加入100μmol/L白藜芦醇苷培养2 h,再加入10 ng/mL TGF-β1培养24 h;B组加入30μmol/L的miR-21抑制剂培养6 h,再加入100μmol/L白藜芦醇苷培养2 h,再加入10 ng/mL TGF-β1培养24 h;C组加入10 ng/mLTGF-β1培养24 h;D组为空白对照,加入普通培养基.培养结束时,MTT法观察各组细胞增殖情况(光密度OD值表示增殖能力),分光光度计测算各组细胞氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯负载法测算活性氧簇(ROS)含量,Western blotting法检测各组miR-21及NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)、caspase-1、白细胞介素1β(IL-1β)蛋白.结果A、B、C、D组细胞OD值分别为14.73±1.60、12.70±1.13、19.31±1.79、12.62±1.26,与D组比较,C组细胞OD值升高(P<0.05);与C组比较,A组细胞OD值降低(P<0.05);与B组比较A组细胞OD值升高(P<0.05).培养24 h时与D组比较,C组细胞MDA、ROS、miR-21、NLRP3、caspase-1及IL-1β相对表达量均升高,SOD相对表达量降低(P均<0.05);与C组比较,A组细胞MDA、ROS、miR-21、NLRP3、caspase-1及IL-1β相对表达量均降低,SOD相对表达量升高(P均<0.05);与B组比较,A组细胞MDA、ROS、miR-21、NLRP3、caspase-1及IL-1β相对表达量升高,SOD相对表达量降低(P均<0.05).结论白藜芦醇苷可抑制TGF-β1诱导的MPC5细胞增殖.其可能作用机制为调控miR-21相关信号通路,增加SOD含量,降低胞内MDA、ROS含量,抑制细胞NLRP3、caspase-1及IL-1β蛋白表达.