甲胎蛋白基因沉默对肝癌细胞迁移黏附能力的影响及其机制

摘要

目的 观察甲胎蛋白(AFP)基因沉默对肝癌细胞迁移黏附能力的影响,并探讨其作用机制.方法 将肝癌细胞系EGHC-9901分为3组,实验组转染pSilencer3.0-H1-AFP质粒以沉默AFP基因表达、载体对照组转染空载体、空白对照组未做任何处理,采用Transwell迁移实验检测各组细胞迁移能力,采用细胞聚集实验检测各组细胞同质黏附能力,采用层黏连蛋白黏附实验检测各组细胞异质黏附能力,采用Western blotting法检测各组细胞黏附分子E-钙黏蛋白、CD44V6、整合素β1、整合素α5、α-连环素、β-连环素、CD15.结果 实验组、载体对照组、空白对照组每个镜下穿膜细胞数分别为(132±16)个、(335±21)个、(371±32)个,实验组与载体对照组、空白对照组相比,P均<0.05.振摇时间40 min时,实验组、载体对照组、空白对照组细胞聚集指数(AI)分别为0.530±0.020、0.223±0.017、0.240±0.012,实验组与载体对照组、空白对照组相比,P均<0.05;振摇时间60 min时,实验组、载体对照组、空白对照组AI分别为0.632±0.031、0.322±0.021、0.376±0.019,实验组与载体对照组、空白对照组相比,P均<0.05.培养60 min时,实验组、载体对照组、空白对照组OD值分别为0.157±0.008、0.347±0.026、0.363±0.039,实验组与载体对照组、空白对照组相比,P均<0.05;培养90 min时,实验组、载体对照组、空白对照组OD值分别为0.139±0.010、0.476±0.023、0.503±0.045,实验组与载体对照组、空白对照组相比,P均<0.05.实验组、载体对照组、空白对照组整合素β1蛋白表达量分别为0.337、0.078、0.051,实验组与载体对照组、空白对照组相比,P均<0.05;实验组、载体对照组、空白对照组CD15蛋白表达量分别为0.221、0.629、0.631,实验组与载体对照组、空白对照组相比,P均<0.05.结论 AFP基因沉默可抑制肝癌细胞迁移,促进肝癌细胞的同质黏附能力,抑制肝癌细胞异质黏附能力.AFP基因可能通过调节黏附分子整合素β1、CD15的表达调控肝癌细胞的迁移黏附能力.