GCSsiRNA载体构建及其对转染人胃癌细胞SGC7901/VCR的作用

摘要

根据siRNA设计原则,针对人葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)mRNA序列设计并合成编码siRNA的寡核苷酸序列,并将其克隆入小干扰RNA表达载体,构建重组质粒.将重组质粒转人耐长春新碱的胃癌细胞株(SGC7901/VCR),通过RT-PCR、免疫细胞化学等方法检测转染细胞GCS的表达水平,以生长曲线观察细胞生长情况.结果 构建的GCSsiRNA表达载体释放出的片段与预期结果一致;转染SGC7901/VCR细胞后,可使细胞中GCSmRNA及其蛋白表达受抑制,细胞生长减慢.提示GCSsiRNA载体的成功构建及其对GCS表达和细胞生长的抑制,使其可能成为肿瘤基因治疗的一种新手段.