粗糠柴霉素抑制碘帕醇诱导的大鼠肾小管上皮细胞凋亡

摘要

目的 研究粗糠柴霉素( Rottlerin)对碘帕醇诱导的大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响,并探讨其机制.方法 体外培养的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)分别用0.5～2μmol/L的Rottlerin与100 mgl/ml碘帕醇共同处理2h,或在碘帕醇处理的同时加入2μmol/L Rottlerin处理不同时间,或以2μmol/L Rottlerin预处理1h后再用碘帕醇处理2h.以相同渗透浓度的甘露醇处理2h的细胞作为对照.Hoechst 33342染色观察凋亡细胞核形态并计算凋亡细胞百分比;以DEVD-AFC为荧光底物测量caspase酶活性;用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平;Western blot检测PKC-δ蛋白表达.结果 碘帕醇可诱导NRK-52E细胞PKC-δ蛋白表达、细胞内ROS生成、caspase酶激活及细胞凋亡.Rottlerin可抑制以上变化,呈剂量依赖性抑制细胞凋亡,但Rottlerin预处理不能减少细胞凋亡.结论 Rottlerin可抑制碘帕醇诱导的NRK-52E细胞凋亡,为造影剂肾病的治疗提供了新药物.