HIF-1α基因干扰对低氧环境下人鼻黏膜上皮细胞TGF-β1、VEGF、bFGF表达的影响及其机制

摘要

目的 观察低氧诱导因子1α(HIF-1α)基因干扰对低氧环境下人鼻黏膜上皮细胞(HNEC)转化生长因子β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 体外培养HNEC,取传3代对数生长期细胞随机分为空白对照组、NC-shRNA组、HIF-shRNA组和低氧诱导组.空白对照组不予任何处理,NC-shRNA组、HIF-shRNA组分别予NC-shRNA、HIF-shRNA转染,并于转染24 h后经CoCl2化学诱导模拟低氧环境;低氧诱导组仅经CoC12化学诱导模拟低氧环境.采用实时荧光定量PCR法和Western blotting法检测各组HIF-1 α、TGF-β1、VEGF、bFGF mRNA和蛋白表达;采用Western blotting 法检测PI3 K/Akt信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt表达.结果 与空白对照组比较,低氧诱导组HIF-1α、VEGF、TGF-β1、bFGF mRNA和蛋白表达均明显升高(P均＜0.05);与NC-shRNA组比较,HIF-shRNA组上述指标mRNA和蛋白表达均明显降低(P均＜0.05).与空白对照组比较,低氧诱导组p-PI3K、p-Akt蛋白表达明显升高(P均＜0.05);与NC-shRNA组比较,HIF-shRNA组p-PI3K、p-Akt蛋白表达明显降低(P均＜0.05);各组PI3K、Akt蛋白表达比较P均＞0.05.结论 低氧诱导HIF-1 α表达可促进人鼻黏膜上皮细胞TGF-β1、VEGF、bFGF表达,干扰HIF-1α基因则抑制上述因子的表达;HIF-1α对上述因子的调控机制可能与其抑制PI3K/Akt信号通路有关.