方格星虫低聚肽的分离、鉴定及其促骨发育作用评价

摘要

目的:从方格星虫中分离和筛选可促进骨形成的生物活性低聚肽.方法:通过酶解法和膜分离法制备寡肽,并通过HPLC-MS/MS鉴定肽段序列.通过在线数据库预测药物形成,并通过斑马鱼模型评估促进骨形成的作用.结果:共鉴定出10种低分子量肽,通过斑马鱼骨发育模型获得了两种潜在的候选肽,其氨基酸序列分别为GFAGDDAPR和GLGGLSPEK;分别命名为GSP1和GSP2;其分子量分别为905.04和857.06 Da;与空白对照组相比,1～50 μg/mL GSP1溶液浓度处理的AB斑马鱼幼鱼颅骨积分光密度和绿色荧光的面积均有所增加,GSP1浓度在5 μg/mL时促进骨发育的效果最好(P＜0.05).1～50 μg/mL GSP2溶液浓度处理的AB型斑马鱼幼鱼颅骨积分光密度和绿色荧光的面积均有所增加,且随着浓度的增加而增大,GSP2浓度在50 μg/mL时促进骨发育的效果最好(P＜0.05).结论:小于1000 Da的寡肽有望成为促进骨形成的候选药物.