泰安樱桃根癌病致病菌分离及生物型鉴定

摘要

由致病性土壤杆菌侵染引起的根癌病严重影响了樱桃树的生长.利用选择性培养基,以阿糖醇和赤藓糖醇作为不同碳源,从山东泰安食用樱桃根部瘤状组织和感病根际土壤中分离到土壤杆菌100余株,通过胡萝卜切片法和番茄茎部针刺接种法从中筛选到31株有致瘤活性的菌株.经16S rDNA和recA基因序列分析,结合生物型检测鉴定出96％以上的致病菌属原生物Ⅱ型(Agrobacterium rhizogenes),只有1株致病菌为原生物工型(A.tumefaciens).根据Ti质粒上致病相关基因保守序列设计3对引物,12株有致瘤活性菌株中11株PCR扩增到目的条带.经分子生物学测定和高压纸电泳检测,所有致病菌株的质粒均为胭脂碱型.建立了致病型土壤杆菌的分子生物学快速鉴定方法,为定向选择生防菌株提供基础.