脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)维甲酸X受体基因克隆及其在温盐胁迫和蜕皮周期中的表达分析

摘要

为了明确脊尾白虾维甲酸X受体基因在环境胁迫和蜕皮周期中的作用,本研究通过RACE技术克隆了脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)维甲酸X受体cDNA全长,命名为EcRXR基因,该cDNA序列全长为1323 bp,开放阅读框(ORF)为855 bp,编码一个284个氨基酸组成的蛋白质,分子量为30.918 kDa,理论等电点为PI为6.788;EcRXR基因推导氨基酸序列经Blastp在线比对分析显示,EcRXR与已知甲壳动物RXR的同源性为71％-90％;系统进化树分析结果显示,脊尾白虾EcRXR的氨基酸序列与日本沼虾RXR的氨基酸序列聚为一支.荧光定量RT-PCR分析表明,EcRXR基因在各组织中均有表达,而在眼柄相对表达量较高,血淋巴中最低.EcRXR基因在蜕皮周期中的表达规律表明,EcRXR基因表达在不同蜕皮时期存在明显变化,在眼柄、肝胰腺、胃和肠中整体呈现上升趋势,在鳃中呈现先下降后上升的趋势,在表皮中呈现逐渐降低的趋势.EcRXR基因在温度、盐度胁迫过程中的表达规律分析结果发现,温度、盐度胁迫均可显著改变EcRXR基因在鳃和肝胰腺中的表达模式,温度胁迫下EcRXR基因在鳃中呈先上升后下降的表达趋势,肝胰腺中整体呈先上升后下降再上升再下降的表达趋势;盐度对鳃和肝胰腺的调控模式相同,均呈先升高后下降的变化趋势.本研究结果表明EcRXR基因在脊尾白虾蜕皮发育、酶活性调控及渗透压调节中发挥重要作用,为深入研究甲壳动物维甲酸X受体基因的功能提供了重要的基础信息.