土牛膝抗炎成分分离、鉴定与含量测定研究

摘要

本研究建立脂多糖诱导的巨噬细胞炎症模型,结合层析法对土牛膝抗炎活性成分进行分离,并用NMR、MS以及与对照品比较,对得到的化合物进行结构鉴定.结果 表明粗毛牛膝醇提取物抗炎效果最佳,其反相层析50％、70％及100％甲醇洗脱物抗炎活性高和细胞毒性低,从50％～70％甲醇洗脱物分离鉴定出9种单体化合物:β-蜕皮甾酮(1)、牛膝甾酮(2)、水龙骨甾酮B(3)、N-反式阿魏酰酪胺(4)、N-顺式阿魏酰酪胺(5)、N-顺式阿魏酰-3-甲氧基酪胺(6)、N-反式阿魏酰-3-甲氧基酪胺(7)、竹节参皂苷Ⅳa(8)、5,2'-二甲氧基-6-甲氧甲基-7-羟基-异黄酮(10);100％甲醇洗脱物鉴定出主要成分竹节参皂苷Ⅰ(9).在LPS +25 μM单体浓度下,化合物抗炎活性由强到弱为4＞1＞5＞2＞6＞9＞10＞3＞7＞8.反相液相色谱测定结果表明,野生牛膝和柳叶牛膝(两年生)地下根茎β-蜕皮甾酮含量在温度高季节含量高,8月份达到最高,分别为0.914±0.016和1.412 ±0.038 mg/g;两年生粗毛牛膝随季节变化规律不明显.具有抗炎活性的阿魏酰酪胺类生物碱首次从土牛膝中分离鉴定.