幽门螺杆菌刺激胃癌细胞株SGC-7901分泌白细胞介素-8过程中核因子κB的作用

摘要

目的探讨胃上皮细胞在幽门螺杆菌(Hp)刺激下分泌白细胞介素-8(IL-8)的过程中, 核因子-κB(NF-κB)的作用.方法电穿孔法将I-κBαM(NF-κB抑制蛋白)基因转染入SGC-7901中,β半乳糖苷酶分析转染效率,Western 印迹分析I-κB基因的表达.将不同浓度的Hp活菌、灭活菌及液体培养上清分别与稳定转染I-κB的胃癌细胞株SGC-7901及其空白质粒对照共同孵育,凝胶电泳迁移率变迁分析(EMSA)和NF-κB荧光素酶报告基因分析检测不同时间细胞内NF-κB的激活, ELISA法检测不同时间细胞上清中IL-8的水平.结果得到了稳定表达I-κB 的SGC-7901细胞,命名为SGC7901-I-κB细胞,其空白质粒对照命名为SGC7901-neo.Hp活菌刺激的SGC7901-neo在2 h和4 h时可检测到明显的NF- κB激活,灭活菌和液体培养上清刺激下无激活;Hp活菌、灭活菌和培养上清刺激下SGC-7901-I-κB内均无NF- κB激活.4 h时,2×107Hp/ml的Hp活菌刺激下即可检测到SGC7901-neo内明显的IL-8分泌,并有时间-剂量依赖效应;灭活菌和液体培养上清无此作用.Hp活菌、灭活菌和液体培养上清均不能刺激SGC7901-I-κB产生IL-8.结论 Hp诱导胃上皮细胞分泌IL-8依赖于NF-κB的激活.