抑制葡萄糖调节蛋白78表达逆转人卵巢癌细胞顺铂耐药机制的分析

摘要

目的探讨抑制葡萄糖调节蛋白78（GRP78）表达对卵巢癌细胞顺铂敏感性的影响及其在卵巢癌顺铂耐药中的作用和机制。方法构建特异性靶向GRP78的siRNA表达质粒,MTT法检测细胞生存率,逆转录多聚酶链链式反应和免疫印迹方法检测内质网应激相关、凋亡相关基因蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果顺铂（6 mg/L）作用于SKOV3细胞诱导GRP78、CHOP和cleaved-caspase 4表达均增高;作用于SKOV3/DDP细胞可诱导GRP78表达明显增高,但CHOP和cleaved-caspase 4表达无明显差异。抑制GRP78表达与顺铂联合作用能明显增加SKOV3/DDP细胞cleaved-caspase 4和3表达,增加细胞凋亡率。抑制SKOV3/DDP细胞GRP78表达,能降低顺铂诱导的p-Akt和p-mTOR表达上调,增加XBP1 mRNA剪切表达和CHOP mRNA表达。结论抑制GRP78表达能与顺铂协同作用增加细胞凋亡的发生而逆转SKOV3/DDP细胞对顺铂的耐药性,其机制可能是通过影响Akt/mTOR信号通路的活性、CHOP表达水平和caspases活性导致的。