基于血清药物化学和网络药理学的厚朴“下气除满”药效物质基础和作用机制研究

摘要

目的:基于血清药物化学与网络药理学探究厚朴“下气除满”药效物质基础和作用机制。方法:采用高效液相色谱-质谱法分析厚朴水煎剂及大鼠血清、尿液、粪便中的成分。分析条件为Agilent Extend-C;色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%甲酸(A)-乙腈(B)梯度洗脱;柱温为35℃;体积流量为1.0 mL·min;进样量为10μL。利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、STITCH、SwissTargetPrediction、SuperPred数据库收集厚朴入血成分作用靶点,以“gastroparesis”为胃轻瘫疾病检索词,通过TTD、DiGSeE、OMIM、DrugBank和HPO数据库构建胃轻瘫靶点数据库,采用Cytoscape 3.5.1软件构建药物-入血成分-靶点网络图和蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,寻找核心靶点,通过DAVID数据库对核心靶点进行基因本体(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,阐述其作用机制。结果:从厚朴水煎剂中共鉴定54个成分;从大鼠血清中鉴定出14个成分,分别为和厚朴酚、厚朴酚、6′-O-甲基和厚朴酚、厚朴木脂素E、5-烯丙基-5′-(1″-羟基丙烯氧)联苯-2,2′-二醇、厚朴木脂素A、厚朴木脂素B、厚朴木脂素C、和厚朴三醇、木兰花碱、木兰箭毒碱、番荔枝碱、β-桉叶醇和β-谷甾醇;从大鼠尿液和粪便中共鉴定出13个成分,多数为入血的原型成分。入血成分共涉及118个靶点,其中人激肽原1(KNG1)、磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基α(PIK3CA)、表皮细胞生长因子(EGF)、内皮型一氧化氮合酶3(NOS3)、血管内皮生长因子A(VEGFA)为PPI中的核心基因;富集分析显示厚朴入血成分可能通过雌激素信号通路、RAS信号通路及胰岛素神经通路等发挥胃肠推动作用。结论:厚朴酚类和生物碱类成分可能是厚朴发挥“下气除满”功效的物质基础,为其质量标志物的研究提供参考。