海洋来源链霉菌OUCMDZ-3434中wblA基因的功能

摘要

[背景]Streptomyces sp.OUCMDZ-3434分离自山东青岛栈桥浒苔样品,其次级代谢产物Wailupemycin类化合物具有良好的α-糖苷酶抑制活性,但产量很低,影响了其进一步研发.[目的]建立海洋来源链霉菌Streptomyces sp.OUCMDZ-3434菌株的遗传转化系统,通过阻断全局性调控基因wblA探究Wailupemycin类化合物产量变化.[方法]以pSET 152为载体,采用大肠杆菌-链霉菌属间接合转移策略建立了Streptomyces sp.OUCMDZ-3434的遗传转化方法.采用PCR-Targeting策略构建了wblA基因阻断突变株,通过HPLC分析野生型和突变株发酵产物的差异并对表型差异进行显微形态观察.[结果]建立了Streptomyces sp.OUCMDZ-3434遗传转化系统,构建了wblA基因阻断突变株,与野生株相比,突变株发酵产物中WailupemycinG产量提高了3倍,同时丧失了产生孢子的能力.[结论]在Streptomyces sp.OUCMDZ-3434中wblA对Wailupemycin类化合物生物合成起到了负调控作用,同时参与调控孢子形成,本研究为采用遗传改造策略提高Wailupemycin G产量提供了参考.