猪链球菌2型Dbp缺失株的构建及特性分析

摘要

[目的]通过构建DNA结合膜蛋白(DNA-binding membrance protein,Dbp)基因的缺失株,探究Dbp基因对猪链球菌2型强毒株毒力的影响.[方法]通过PCR检测Dbp基因的分布.利用同源重组原理构建Dbp基因上下游片段的重组质粒,将构建好的质粒电转入ZY05719感受态细胞中,筛选Dbp缺失突变株,通过PCR及测序分析对其进行验证.生物学特性分析比较缺失株ΔDbp和野毒株ZY05719在生长速率、形态特征、毒力等方面的差异.[结果]Dbp基因为猪链球菌2型强毒株中相对保守基因,构建了Dbp基因缺失株ΔDbp.体外实验结果显示Dbp基因缺失株的生长速率在对数期减慢,并且缺失株ΔDbp的荚膜同野毒株存在显著差异,斑马鱼实验结果表明缺失株ΔDbp毒力下降.[结论]Dbp与猪链球菌2型的毒力相关,在猪链球菌2型的致病过程中起一定的作用,这丰富了对该菌致病机理的认识.