华根霉固态与液态培养产胞外蛋白的比较蛋白质组学分析

摘要

[目的]考察固态和液态两种培养方式对丝状真菌华根霉(Rhizopus chinensis) CCTCCM201021产胞外蛋白的影响,以加深对微生物固、液态培养特异性产酶的认识.[方法]利用成分相同的培养基对华根霉分别进行平板固态培养和液态培养,提取华根霉所产胞外蛋白,采用二维凝胶电泳(2-DE)结合质谱分析,分离鉴定差异蛋白.[结果]固态培养下华根霉所产胞外蛋白的蛋白酶活性是液态培养的9.2倍.胞外蛋白质组数据分析表明,华根霉固态和液态培养所产胞外蛋白存在显著差异,其中约70％是固态和液态培养下各自产生的特有蛋白.质谱鉴定进一步表明,固、液态培养对华根霉产胞外蛋白的种类和表达量都有显著影响,其中水解酶类所占比例较大,主要是与蛋白质降解相关的蛋白.[结论]固态和液态不同培养方式影响了华根霉产胞外蛋白的组成,有些基因只在特定培养方式下表达.固态培养下华根霉产胞外蛋白酶种类相对更多以及大部分蛋白酶的上调表达,可能是固态培养下胞外蛋白酶活性很高的原因.研究结果提示需要注意固液态不同培养方式下丝状真菌胞外酶的筛选和生产可能存在的不一致性.