β-D-半乳糖苷酶动力学测定方法探讨及初步临床应用

摘要

目的 建立β-D-半乳糖苷酶(GAL)自动化分析方法 .方法 用2-氯-4-硝基苯基-β-D-半乳糖苷(CNP-GAL)为底物,在pH值4.8柠檬酸-柠檬酸钠缓冲体系下,在405 nm处测定产物吸光度值的变化,得出GAL活性.用此方法 检测了58名正常体检者及88例患者(包括急性肾功能衰竭15例、尿毒症32例、糖尿病肾病18例、高血压肾病23例)的GAL水平.结果 本方法 最适pH值为4.8,基质浓度为2.5 mmol/L.批内、批间平均变异系数(CV)分别为3.44%、5.17%.米氏常数(Km)为0.45 mmol/L.正常对照组GAL中位数(范围)为6.2(4.8～7.8) U/gCr,急性肾功能衰竭组为190(74.2～285.6) U/gCr,尿毒症组为39.6(8.9～161.0) U/gCr,糖尿病肾病组为11.3(5.5～67.0) U/gCr,高血压肾病组为16.1(4.1～137.5) U/gCr,与正常对照组比较差异均有统计学意义(P<0.001、P<0.05).结论 该法简便、快捷、精确,可用于自动化分析,并且留样方便,适宜临床常规应用.GAL可作为评价肾小管疾病及肾实质性疾病的一项指标.