基因芯片技术检测临床常见致病性念珠菌和新型隐球菌及ERG11基因点突变的实验分析

摘要

目的 建立基因芯片技术检测临床常见致病性念珠菌和新型隐球菌及氟康唑耐药白念珠菌相关ERG11基因点突变的试验方法.方法针对临床常见的5种致病性念珠菌和新型隐球菌5.8S rDNA与28S rDNA间的内转录间区2(ITS-2)基因设计、合成一系列寡核苷酸探针,制备寡核苷酸芯片,以鉴定5种致病性念珠菌和新型隐球菌;设计、合成能够特异性扩增ERG11基因点突变的引物,并采用不对称荧光聚合酶链反应(PCR)扩增ERG11基因,将PCR产物与芯片进行杂交.结果采用特异性引物和不对称荧光PCR从12株临床分离耐药株中成功扩增出ERG11基因4个突变点;采用基因芯片杂交技术成功鉴定5种临床常见致病性念珠菌和新型隐球菌.结论制备的寡核苷酸基因芯片,可以用于鉴定临床常见的致病性念珠菌和新型隐球菌.