安罗替尼联合放射治疗对食管鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡及放射治疗敏感性的影响

摘要

目的探讨安罗替尼联合放射治疗对食管鳞状细胞癌细胞的增殖、凋亡及放射治疗敏感性的影响。方法将对数生长期的食管鳞状细胞癌KYSE-150细胞随机分为0μmol·L^(-1)安罗替尼组、2μmol·L^(-1)安罗替尼组、4μmol·L^(-1)安罗替尼组、8μmol·L^(-1)安罗替尼组、16μmol·L^(-1)安罗替尼组、32μmol·L^(-1)安罗替尼组、64μmol·L^(-1)安罗替尼组、128μmol·L^(-1)安罗替尼组,分别用含终浓度为0、2、4、8、16、32、64、128μmol·L^(-1)安罗替尼的培养基进行培养。采用细胞计数试剂盒-8法检测8组食管鳞状细胞癌KYSE-150细胞的增殖能力,并计算细胞增殖抑制率。应用Graphpad Prism8软件绘制细胞增殖抑制曲线并计算半抑制浓度(IC 50),选择IC 50值最小时的安罗替尼浓度及处理时间作为后续实验的药物处理条件。另收集对数生长期的食管鳞状细胞癌KYSE-150细胞,随机分为0 Gy单独照射组、2 Gy单独照射组、4 Gy单独照射组、6 Gy单独照射组、0 Gy联合照射组、2 Gy联合照射组、4 Gy联合照射组、6 Gy联合照射组。0 Gy单独照射组、2 Gy单独照射组、4 Gy单独照射组、6 Gy单独照射组细胞分别用不含安罗替尼的培养液培养48 h后,更换不含安罗替尼的培养液,并分别给予0、2、4、6 Gy的X射线照射;0 Gy联合照射组、2 Gy联合照射组、4 Gy联合照射组、6 Gy联合照射组使用含终浓度4μmol·L^(-1)安罗替尼的培养液培养48 h后,更换为不含安罗替尼的培养液,同时分别给予0、2、4、6 Gy的X射线照射。采用平板克隆形成实验检测不同X射线照射剂量的单独照射组和联合照射组细胞的克隆形成能力,并计算各组的存活率。将0 Gy单独照射组、2 Gy单独照射组、4 Gy单独照射组、6 Gy单独照射组归为单独照射组,将0 Gy联合照射组、2 Gy联合照射组、4 Gy联合照射组、6 Gy联合照射组细胞归为联合照射组,采用单击多靶模型检测安罗替尼联合放射治疗对KYSE-150细胞放射治疗的敏感性。采用流式细胞术检测0 Gy单独照射组、4 Gy单独照射组、0 Gy联合照射组和4 Gy联合照射组细胞凋亡情况。结果安罗替尼干预24 h时,2μmol·L^(-1)安罗替尼组、4μmol·L^(-1)安罗替尼组、8μmol·L^(-1)安罗替尼组、16μmol·L^(-1)安罗替尼组、32μmol·L^(-1)安罗替尼组、64μmol·L^(-1)安罗替尼组、128μmol·L^(-1)安罗替尼组细胞的增殖抑制率均显著高于0μmol·L^(-1)安罗替尼组(P0.05);安罗替尼干预48 h时,4μmol·L^(-1)安罗替尼组、8μmol·L^(-1)安罗替尼组、16μmol·L^(-1)安罗替尼组、32μmol·L^(-1)安罗替尼组、64μmol·L^(-1)安罗替尼组细胞的增殖抑制率显著高于安罗替尼干预24 h时同药物处理浓度的安罗替尼组(P0.05)。结论安罗替尼联合放射治疗可抑制食管鳞状细胞癌KYSE-150细胞的增殖能力,并增加食管鳞状细胞癌细胞对放射治疗的敏感性。