CircOMA1调控多巴胺受体促进泌乳素瘤耐药性

摘要

【目的】探究环状 RNA hsa_circ_0002316(circOMA1)是否参与泌乳素瘤耐药调控及其作用机制是什 么。【方法】通过 RT-qPCR检测临床泌乳素瘤标本中 circOMA1表达情况(5例敏感泌乳素瘤标本和 12例耐药泌乳 素瘤标本)。通过慢病毒载体构建稳定表达外源性 circOMA1 MMQ细胞系模型进行体外实验,分为 MMQ NC组及 MMQ OMA1组。通过构建裸鼠皮下肿瘤模型进行体内实验,分为 MMQ NC+卡麦角林(CAB)组、MMQ NC+溴隐亭 (BRC)组、MMQ OMA1+CAB组、MMQ OMA1+BRC组。通过 CCK8、Western blot、ELISA等表型实验检测 circOMA1对 耐药机制中的细胞增殖和泌乳素(PRL)分泌两个方面的影响。通过 Western blot、ELISA、免疫组化等实验检测 cir⁃ cOMA1 对多巴胺受体表达的影响。通过 TargetScan、CircInteractome 等软件分析预测、microRNA-145-5p(miR 145-5p)minic补救实验探究 circOMA1调控多巴胺受体机制。【结果】RT-qPCR结果显示多巴胺受体激动剂(DAs) 耐药泌乳素瘤中 circOMA1表达升高(P<0.01)。在细胞实验及裸鼠皮下肿瘤实验中,与 MMQ NC 组相比,MMQ OMA1组 DAs敏感性降低,细胞增殖水平和泌乳素分泌水平升高(P<0.05)。Western blot和免疫组化结果显示, MMQ OMA1组多巴胺 2型受体(DRD2)表达下调,多巴胺 5型受体(DRD5)表达上调,环 3’,5’-单磷酸腺苷(cAMP) 水 平 上 调(P<0.05)。 此 外 ,在 MMQ OMA1 组 中 miR-145-5p 表 达 下 调 ,kelch 重 复 序 列 和 BTB 结 构 域 蛋 白 7 (KBTBD7)mRNA及蛋白表达水平上调(P<0.05),然而 MMQ OMA1组转染 miR-145-5p minic后,KBTBD7表达下 调,DRD2表达上调(P<0.05),表明过表达 miR-145-5p逆转了 circOMA1对 KBTBD7的促进作用。【结论】circOMA1 通过 miR-145-5p/KBTBD7轴下调 DRD2表达,降低泌乳素瘤对 DAs敏感性,并且调控多巴胺受体表达激活 cAMP通 路促进泌乳素合成释放,从而促进泌乳素瘤耐药性。