CFTR氯通道调控小鼠内毒素血症血小板活化及炎症因子生成

摘要

【目的】囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)氯通道参与血小板活化的调控。本研究探讨CFTR氯通道对脂多糖(LPS)引起的内毒素血症过程中血小板活化、血小板数目及血小板介导炎症因子生成的影响。【方法】应用8~12周龄CFTR全基因敲除(Cftr-/-)小鼠及野生型(Cftr+/+)小鼠,制备股静脉注射LPS诱导内毒素血症模型。分离小鼠外周血的血小板,采用免疫印迹法检测TLR4蛋白的表达,采用实时定量PCR法检测炎症因子IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α和CRP的表达。采用腺病毒介导的CFTRcDNA过表达(Ad-CFTR)和应用CFTR矫正剂VX-661处理人巨核细胞株MEG-01,检测CFTR对LPS引起的上述指标变化的影响。【结果】Cftr+/+小鼠静脉注射LPS后,外周血血小板TLR4和P-selectin表达增加、血小板数目减少、血小板表达促炎炎症因子mRNA水平升高,而CFTR全基因敲除加重之(P<0.05)。体外MEG-01人巨核细胞应用LPS刺激后,CFTR蛋白表达降低,TLR4蛋白表达升高,LPS上调IL-1β、CRP、TNF-α而下调IL-10表达(P<0.01);Ad-CFTR或VX661可部分或全部逆转上述效应(P<0.01)。【结论】本研究揭示了CFTR氯通道可调控血小板活化及血小板TLR4介导的炎症因子生成。