miR-299-5p通过靶向SOX4调控胃癌细胞的增殖与凋亡

摘要

目的:探讨miR-299-5 p对胃癌细胞增殖与凋亡的作用及相关机制.方法:采用RT-qPCR法检测胃癌细胞(SGC-7901、BGC-823)及正常胃黏膜上皮细胞(RGM-1)中miR-299-5p的表达差异.利用生物信息学方法预测miR-299-5 p的靶基因,并使用荧光素酶报告实验验证miR-299-5 p与SOX4的靶向关系.分别将miR-299-5p mimics和pcDNA3.1-SOX4转染至胃癌细胞中构建过表达模型,采用CCK-8法、流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡情况.Western blot检测靶基因SOX4及相关蛋白(Bcl-2、Bax)表达水平.结果:胃癌细胞中miR-299-5 p呈低表达,SOX4呈过表达;miR-299-5 p过表达可显著下调SOX4蛋白水平;miR-299-5 p与SOX4的mRNA 3'UTR区序列配对互补,SOX4是miR-299-5 p的一个潜在靶作用结合位点;miR-299-5 p过表达显著降低SOX4野生型荧光素酶活性,抑制胃癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,同时可下调SOX4、Bcl-2水平,上调Bax蛋白表达水平;上调SOX4可逆转miR-299-5 p过表达对胃癌细胞的作用效果.结论:miR-299-5 p在胃癌细胞中呈低表达,其通过下调SOX4表达抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡.