siRNA干扰S100A4蛋白引起钙离子信号改变后对人胃癌细胞的影响

摘要

目的:探讨siRNA干扰S100A4蛋白引起钙离子信号改变后对人胃癌细胞的影响.方法:利用lip2000将siRNA-NC和siRNA-S100A4转染进胃癌细胞SGC-7901和MGC-803中.S100A4的基因表达的变化由qRT-PCR检测验证;细胞增殖能力的改变通过MTT、细胞克隆、细胞凋亡实验检测.侵袭和迁移能力的改变利用Transwell实验和细胞划痕实验检测;采用荧光探针Fura-2乙酰羧甲酯(Fura-2/AM)测定细胞内钙离子浓度.Western blot检测蛋白激酶PKC-α、钙调蛋白CaM和S100A4蛋白的表达变化.结果:与siRNA-NC组相比,siRNA-S100A4组S100A4基因的水平显著降低;细胞增殖、侵袭和迁移能力也降低;siRNA-S100A4组细胞的凋亡增加,细胞内PKC-α、CaM和S100A4蛋白以及游离钙离子浓度降低.结论:下调S100A4的表达使细胞内钙离子浓度降低,从而导致需要钙离子激活才能发挥作用的PKC-α和CaM蛋白表达量降低,进而诱发一系列生物功能改变.