绿色荧光蛋白基因标记的胃癌细胞系的建立

摘要

目的建立能连续传代稳定高表达绿色荧光蛋白(GFP)的胃癌细胞株,探讨胃癌的生长与转移特征.方法利用脂质体将携带GFP-cDNA的真核表达载体质粒转染胃癌细胞株GC9811-P,经过G418筛选和克隆化培养,用荧光显微镜及流式细胞仪检测转染的EGFP基因在癌细胞体内外的表达,MTT比色法观察细胞生长,Western blot检测转染细胞和未转染细胞肿瘤相关抗原的表达.结果携带EGFP的真核表达载体能有效地转染胃癌细胞GC9811-P,转染的细胞能稳定、高效和持久地表达EGFP,与未转染细胞比较,他们的生物学特性未改变(P>0. 05).在裸鼠皮下肿瘤中,EGFP也能稳定、高效的表达.结论胃癌GC9811P-GFP的建立为研究肿瘤侵袭和转移的发生机制提供了理想的细胞株.