流式细胞技术和CCK-8法检测 γδ T细胞活性的比较

摘要

目的:比较流式细胞技术和CCK-8法检测 γδT细胞的活性.方法:密度梯度离心法分离外周血中单个核细胞(PBMCs),经磷酸抗原IPP刺激扩增培养14天,收集 γδT细胞.将收获的 γδT细胞分为两组:一组将乳腺癌MCF-7细胞与 γδT细胞共培养4 h,Calcein-AM/PI双染后流式细胞仪检测;另一组将乳腺癌MCF-7细胞与 γδT细胞共培养4 h,采用CCK-8试剂盒检测.比较两种方法检测 γδT细胞对MCF-7细胞毒活性的差别.结果:效靶比为5:1、10:1、20:1两种方法检测细胞毒活性结果分别为:流式细胞术组为37.30％ ±0.14％、40.30％ ±0.11％、50.70％ ±0.19％;CCK-8法组为17.90％ ±1.14％、25.70％ ±1.99％、43.10％ ±1.42％,两组之间差异有统计学意义(P<0.05).Calcein-AM/PI双染后经流式检测法能较好的区分活细胞和凋亡细胞,且其结果的准确性、稳定性和重复性强于CCK-8法.结论:流式细胞术较CCK-8法稳定性好,准确性高,是一种优于CCK-8法的检测免疫细胞毒活性的方法.