ARF4通过EGFR通路调控非小细胞肺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡

摘要

目的:探究ADP核糖基化因子4(ADP-ribosylation factor 4,ARF4)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)发生发展中的生物学作用及作用机制。方法:采用蛋白质印迹法(Western blot,WB)和免疫组化技术检测ARF4在临床NSCLC组织和癌旁组织中的表达情况;使用TCGA数据库分析ARF4与肺癌患者预后的相关性;使用siARF4敲降人NSCLC细胞系A549和H1975细胞中ARF4的表达水平,并用WB和实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)法进行验证;通过CCK-8实验检测敲低ARF4以及敲低ARF4与顺铂联用对NSCLC细胞增殖的影响;利用Transwell实验检测敲低ARF4以及敲低ARF4与顺铂联用对NSCLC细胞迁移及侵袭的影响;通过流式细胞术检测敲低ARF4以及敲低ARF4与顺铂联用对NSCLC细胞凋亡的影响;通过WB实验探究敲低ARF4后NSCLC中EGFR通路的变化。结果:ARF4在NSCLC组织中的表达较癌旁组织显著升高,且和患者的较差预后显著相关;在A549和H1975细胞中敲低ARF4能够抑制细胞的增殖、迁移、侵袭和促进细胞凋亡;敲低ARF4和顺铂联用可进一步抑制细胞的增殖、迁移、侵袭和增加细胞凋亡;敲低ARF4抑制了细胞内EGFR通路的激活。结论:ARF4通过EGFR通路调控NSCLC的生理功能;ARF4敲低和顺铂联用有效抑制NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡。