蜂毒素-SP94杂合基因原核表达载体的构建及蛋白纯化

摘要

用可以特异结合到肝癌细胞膜上的小肽SP94,与蜂毒素连接,构建重组表达载体pET32a-蜂毒素-SP94.转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测表达结果,产物经Ni-NTA Agrosc亲和层析柱纯化后进行Tricine-SDS-PAGE检测.重组蛋白在大肠杆菌中高效表达,约占细胞总蛋白的30%,超声破碎后50%的目的蛋白以可溶性形式存在,纯化后获得高纯度蛋白.本实验为肝癌的靶向治疗研究与临床应用提供了新思路.