海萝凝集素的分离纯化及性质

摘要

海萝(Gloiopeltis furcata)经PBS缓冲液抽提、硫酸铵分级、DEAE-52纤维素离子交换层析和SephadexG-200分子筛层析,从中纯化出海萝凝集素(GFL),在PAGE和等电聚焦电泳上各显示单一蛋白染色带,其等电点为9.0.用SephadexG-200分子筛层析测得其相对分子质量为8318.海萝凝集素除对人血型红细胞无凝集活性外,对单胞藻及兔、鲤、鲫的红细胞均表现出一定程度的凝集活性,对兔红细胞的凝集活性最强,且不被已测试的D-果糖、D-半乳糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖所抑制,而被D-甘露糖、牛甲状腺球蛋白、鸡卵白蛋白、γ-球蛋抑制.该凝集素在pH 4.0～10.2均有活性,而在pH 6.5～9.1时活性较高.该凝集素在90℃加热1h,活力并未减弱,说明这种凝集素具有很强的耐热性.