抗人心肌肌钙蛋白T杂交瘤细胞系的建立及初步鉴定

摘要

[目的]建立稳定分泌抗人心肌肌钙蛋白T(cardic troponin,cTnT)单克隆抗体的杂交瘤细胞株.[方法]以纯化的cTnT(分子质量为3.7×107)加福氏佐剂免疫8周龄雌性Balb/c小鼠,取免疫脾细胞与骨髓瘤细胞sp2/0融合,以酶联免疫吸附法(ELISA)筛选.阳性克隆以有限稀释法进行克隆化、Western blot法鉴定所制备的单克隆抗体.[结果]共筛出4株稳定分泌抗cTnT单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的抗体效价高达10-5,经免疫学鉴定其分泌的免疫球蛋白类型均为IgG1、κ型,且Western b1ot鉴定4株细胞株所分泌的抗体均与人cTnT均有很好的反应性.[结论]获得4株稳定分泌抗人cTnT单克隆抗体的杂交瘤细胞株,为cTnT的临床研究提供了可能性.