肺表面活性物质制备方法改进的研究

摘要

目的 筛选从矽肺患者双肺大容量灌洗回收液(wLLF)中提取人源性肺表面活性物质(HPS)的条件.方法 以提取HPS纯品的获得量为指标,采用正交实验设计分析最佳提取条件组合,凝胶色谱纯化HPs.HPS纯品组分测定采用总磷脂含量测定(孔雀绿直接显色法),磷脂组分分析采用高效液相色谱法(HPLC).结果 提取最佳的条件组合:初离心3000×g,15 min;3 kD孔径透析袋浓缩;再离心10 000×g,15 min;正丁醇萃取.纯化HPS色谱条件,层析柱:Sephadex LH-20凝胶层析柱(1.5 cm×40cm).流动相:氯仿一甲醇(1:l/v:v),流速:1.0 ml/min;收集220 nm滤片以PC为主峰液体.得到HPS纯品12 646.76 mg.其中磷脂占95.74%.磷脂酰胆碱Pc占80.43%.结论 HPS中磷脂酰胆碱含量高且磷脂成分齐全.该提纯方法值得推广.