松果菊苷调控SIRT1/STAT3信号通路改善CLP大鼠肝损伤及糖代谢紊乱的研究

摘要

目的观察松果菊苷（ECH）对盲肠结扎穿刺（CLP）所致脓毒症大鼠肝损伤及糖代谢紊乱的治疗作用, 并探讨其可能机制。方法 48只雄性SD大鼠随机分为4组, 分别为假手术组（Sham）、模型组（CLP）、治疗组（CLP+ECH）及抑制剂组（CLP+ECH+EX527）。假手术组, 仅接受剖腹手术;模型组, 进行盲肠结扎和穿刺;治疗组, CLP建模后每天灌胃松果菊苷（30 mg/kg）, 持续7 d;抑制剂组, CLP前1 h注射SIRT1抑制剂EX527（5 mg/kg）, 后同治疗组。检测各组大鼠空腹血糖、胰岛素及血清生化指标水平;ELISA法检测血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平;DCFH-DA染色观察各组大鼠肝脏组织中活性氧（ROS）生成情况;HE染色观察各组大鼠肝组织病理改变;Western blot检测各组大鼠肝组织中沉默信息调节因子1（SIRT1）、葡萄糖6-磷酸酶（G6Pase）、磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶（PEPCK）、磷酸化信号转导和转录激活因子3（p-STAT3）和磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）表达。结果与假手术组比较, 模型组大鼠血糖浓度、血清胰岛素、ALT、AST、ROS、IL-1β、IL-6、TNF-α水平上升, 而肝糖原、生存率下降（均P＆0.05）。经松果菊苷治疗后, CLP大鼠血糖浓度、血清胰岛素、ALT、AST、ROS、IL-1β、IL-6、TNF-α水平下降, 肝糖原、生存率上升（均P＆0.05）;SIRT1抑制剂干预后, 抑制剂组的血清胰岛素、ALT、AST、IL-6、ROS水平升高（P＆0.05）。HE染色发现, 模型组大鼠肝脏组织存在炎症细胞的浸润及肝细胞坏死, 而松果菊苷可减轻局灶性和块状坏死;Western blot检测发现:与假手术组比较, 模型组大鼠肝组织中SIRT1、p-STAT3和p-AKT蛋白表达水平下降, 而G6Pase、PEPCK蛋白表达水平升高（P＆0.05）, 而松果菊苷治疗后SIRT1、p-STAT3和p-AKT蛋白表达水平升高, G6Pase、PEPCK蛋白表达水平下降（P＆0.05）。SIRT1抑制剂干预后, 抑制剂组SIRT1、p-STAT3、p-AKT蛋白表达降低, G6Pase、PEPCK蛋白表达升高（P＆0.05）。结论松果菊苷是脓毒症相关肝损伤及糖代谢紊乱的潜在治疗剂, 其机制可能通过SIRT1介导激活肝脏中STAT3、AKT而起作用。