白血病骨髓基质细胞黏附对Jurkat细胞周期及调控的影响

摘要

目的观察白血病骨髓基质细胞-Jurkat细胞共培养模型中Jurkat细胞的化疗敏感性,探讨基质细胞黏附对Jurkat细胞周期及其调控蛋白表达的影响。方法常规分离、培养骨髓基质细胞,Jurkat细胞与60co照射的基质细胞层黏附培养,构建基质细胞-Jurkat细胞共培养模型,扫描电镜观察,通过MTF法测定Jurkat细胞DNR的IC50,流式细胞仪检测Jurkat细胞周期分布,west-ern blot检测黏附培养4、24和48 h Jurkat细胞周期调控蛋白cyclin A、cyclin E及p27的表达。结果悬浮培养Jurkat细胞的IC50为0.45μmoL/L,而白血病基质细胞及正常基质细胞黏附组IC50分别为2.30μmoL/L和1.78 μLmoL/L。Jurkat细胞与基质细胞黏附培养24 h,Co-C,期细胞的比例明显升高（48.74%±8.77%）,与悬浮对照组（27.83%±1.86%）比较差异有统计学意义P＜0.01,C2-M期细胞比例明显降低为2.01%±1.17%,与悬浮对照组（20.33%±1.84%）比较差异有统计学意义P＜0.01;western Blot检测发现cyclin A、cyclin E的表达在Jurkat细胞黏附培养4 h时即有所下调,24 h和48 h尤为明显,而p27的表达则出现上调,以48 h最为明显。结论白血病基质细胞黏附能介导白血病细胞耐药,其机制可能与白血病细胞周期改变有关。