高糖对肾小管上皮细胞Toll样受体4表达的影响

摘要

目的本实验旨在探讨高糖对肾小管上皮细胞Toll样受体4（TLR4）表达的影响及其在糖尿病肾病中的意义。方法体外培养肾小管上皮细胞（NRK-52E）,分成LG组（给予5 mmol/L葡萄糖的DMEM培养）和HG组（给予25 mmol/L葡萄糖的DMEM培养）,不同时间收集细胞,采用细胞免疫化学、Rt-PCR、Western Blot检测TLR4蛋白和mRNA表达情况,同时取细胞培养上清液用Elisa法检测IL-6、TNF-α水平。结果在高糖刺激6 h TLR4 mRNA出现表达明显增高,维持较高表达至274 h,而48 h后表达有所下降（P＜0.05）。HG组培养24h TLR4蛋白升高,48hTLR4蛋白表达进一步升高,与LG组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。HG组NRK-52E上清液IL6、TNF-α的表达较LG组明显升高（P＜0.05）,并与TLR4蛋白呈正相关（r=0.799,0.820）。结论高糖可能通过上调NRK-52E的TLR4的表达,导致TNF-α、IL-6等炎性因子表达升高,TLR4参与了糖尿病肾病的进展。