人羊膜修复病理眼表的实验研究

摘要

目的通过对人羊膜的实验室研究,明确人羊膜上皮不同位置细胞的干细胞活性差异,以指导临床医生取材、制备、保存和应用人羊膜植片。为病理眼表修复中羊膜植片的应用提供实验依据。方法对羊膜植片进行实验室检查,应用HE染色、免疫组织化学染色方法观察不同厚薄羊膜材料上皮细胞排列分布情况;应用胰酶消化分离羊膜上皮细胞,采用免疫组织化学法、流式细胞分析术、免疫荧光法测定人羊膜上皮近基底层细胞与近表层细胞表达胚胎干细胞标志物（SSEA-3、SSEA-4、SSEA-1、TRA1-60、TRA1-81）、多潜能细胞转录因子（Nanog、Oct4、Sox2）的差异性。结果人羊膜近脐带区较厚,约为0.4 mm;人羊膜上皮近基底层细胞区域胚胎干细胞标志物（SSEA-3、SSEA-4、SSEA-1、TRA1-60、TRA1-81）和多潜能细胞转录因子（Nanog、Oct4、Sox2）表达阳性率明显高于人羊膜上皮近表层细胞区域,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论羊膜上皮近基底层细胞区具有更强的类胚胎干细胞活性,临床进行人羊膜取材时,应尽量选用较厚的新鲜人羊膜组织进行制备和移植,更有利于眼表修复的成功。