负载转化生长因子β3的藻酸钙凝胶复合脂肪间充质干细胞修复兔关节软骨缺损的实验研究

摘要

目的以负载转化生长因子β3（TGF-β3）的藻酸钙凝胶（CAG）复合脂肪间充质干细胞（ADSCs）构建的组织工程软骨,探讨其修复兔关节软骨缺损的效果。方法取新西兰白兔皮下脂肪,分离培养得到ADSCs。暴露股骨踝关节面,并做全层关节软骨缺损模型。将ADSCs种植到负载TGF-β3的CAG支架材料上,构建组织工程软骨,移植到兔关节软骨缺损处。实验分为对照组（向关节腔内注射无菌等渗盐水）、CAG组（注射CAG）、ADSCs+CAG组（注射负载ADSCs的CAG）、TGF-β3+CAG组（注射负载TGF-β3的CAG）、TGF-β3+ADSCs+CAG组（注射负载TGF-β3、ADSCs的CAG）,每组10只。于术后12周,分别采用大体观察、HE染色、番红-O及Ⅱ型胶原免疫组化染色等方法观察关节软骨缺损的修复情况,并用国际关节软骨修复协会（ICRS）制订的评分法进行组织学评分。结果 TGF-β3+ADSCs+CAG组的缺损软骨修复效果明显优于其他组,其新生组织与周围正常组织紧密结合,并且细胞外基质的分泌情况与正常组织相似。对照组、CAG组、ADSCs+CAG组、TGF-β3+CAG组和TGF-β3+ADSCs+CAG组的ICRS评分分别为（7.06±0.18）分、（7.15±0.23）分、（7.45±0.25）分、（7.47±0.24）分和（15.78±0.24）分,TGF-β3+ADSCs+CAG组明显优于其他各组,差异有统计学意义（P＆0.05）。结论负载TGF-β3、ADSCs的CAG修复兔关节软骨缺损具有较好的效果,而且是一种结构性的修复。