维拉帕米耐药性人白血病细胞亚系的建立及其耐药机制的研究

摘要

为探讨人白血病细胞对耐药逆转维拉帕米的耐药机制，我们通过不断提高培养液中维拉帕米浓度建立维拉帕米耐药性Ｋ５６２亚系（Ｋ５６２／ＶＥＲ），采用ＭＴＴ法测定维拉帕米、潘生丁和环孢素Ａ对Ｋ５６２、Ｋ５６２／ＶＥＲ细胞的毒性或耐药性；采用高效液相色谱仪、荧光检测器检测细胞内维拉帕米聚集量；采用Ｓ—Ｐ免疫细胞化学技术检测Ｐ—糖蛋白（ＰｇＰ）、ＧＳＴ、癌基因蛋白和抑癌基因蛋白的表达。结果显示：Ｋ５６２／ＶＥＲ细胞对ＶＥＲ的耐药程度是Ｋ５６２细胞的１０４倍，并对潘生丁和环孢素Ａ存在交叉耐药性；Ｋ５６２／ＶＥＲ细胞内ＶＥＲ聚集量比Ｋ５６２细胞下降３５～４３倍，二者均中度或高度表达Ｐ５３、Ｐ１６、ｃ—ｆｏｓ蛋白，低度表达Ｐ２１蛋白；Ｋ５６２／ＶＥＲ细胞高度表达ＰｇＰ，Ｂｃｌ－２只在Ｋ５６２细胞中表达。说明Ｋ５６２细胞系能产生对ＶＥＲ的获得性耐药性，其耐药机制可能与ＰｇＰ表达过量，并由此导致细胞内ＶＥＲ聚集下降等因素有关。