慈竹CBF1全长基因的克隆及其分析

摘要

分离和克隆慈竹CBF1基因,探明低温下转基因烟草诱导的表达情况,以慈竹叶片为材料,通过RT-PCR和RACE技术克隆慈竹CBF1基因的全长cDNA序列,并进行生物信息学分析;同时选用转基因烟草T2代株系为材料,进行半定量RT-PCR,分析NaCBF1基因在烟草中的表达情况。结果表明：克隆得到慈竹NaCBF1基因（Gen Bank登陆号为JN896707）,全长序列为1 051 bp,其中包括5＇-UTR 54 bp,3＇-UTR 334 bp,编码区663 bp,编码223个氨基酸,分子量为23.48 kDa,等电点为5.27,为不稳定疏水性蛋白。氨基酸序列比对分析表明,NaCBF1与CtCBF1、HvCBF1和TaCBF1一致性分别为93%、86%和85%,且NaCBF1与CtCBF1、PeDREB1聚为一类。不同低温胁迫下,转NaCBF1基因烟草植株均能正常转录,表明具有耐寒性。NaCBF1参与植物对低温胁迫的调控,对其环境胁迫响应还有待探讨,为进一步分析其在不同信号途径相互作用中的功能和调控机制提供有力证据。