ABT-737对TAMs与SKOV3细胞共培养中卵巢癌细胞生长与血管拟生作用的影响

摘要

目的:探究Bcl-2小分子抑制剂ABT-737对肿瘤相关巨噬细胞(tumour-associated macrophages,TAMs)与人卵巢癌细胞SKOV3共培养体系内SKOV3细胞生长与血管生成拟态的影响。方法:使用白细胞介素-4(IL-4)和佛波酯(PMA)体外诱导THP-1细胞为TAMs细胞,MTT法检测不同浓度ABT-737处理SKOV3细胞24 h后的细胞存活率,建立SKOV3细胞和TAMs细胞的共培养体系,实验分组为对照组、SKOV3+ABT-737组(含5.0μmol/L ABT-737培养细胞)、TAMs+SKOV3组(SKOV3细胞与TAMs细胞共培养)、TAMs+SKOV3+ABT-737组(SKOV3细胞与TAMs细胞共培养,加入含5.0μmol/L ABT-737),24 h后收集细胞,MTT法检测细胞存活率,EdU染色检测细胞增殖情况,Transwell小室实验检测细胞迁移与侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,血管拟态生成实验检测细胞血管形成能力,Western blot检测细胞血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9表达。结果:成功诱导THP-1细胞成为TAMs细胞;经ABT-737作用下SKOV3细胞存活率下降(P<0.01);与对照组比较,SKOV3+ABT-737组SKOV3细胞存活率降低,EdU标记的阳性细胞数目减少,细胞迁移与侵袭数目也减少,细胞凋亡率升高,管道分支减少,VEGF、MMP-2、MMP-9蛋白表达下降(P<0.01);与TAMs+SKOV3组比较,TAMs+SKOV3+ABT-737组细胞存活率降低,EdU标记的阳性细胞数目、细胞迁移与侵袭数目也减少,细胞凋亡率增加,管道分支减少,同时VEGF、MMP-2、MMP-9蛋白表达下降(P<0.01)。结论:ABT-737在共培养体系中能够抑制SKOV3细胞增殖、转移、凋亡以及血管拟生,影响肿瘤的进展。