siRNA沉默KAP-1表达抑制胰腺癌细胞PANC-1的侵袭能力

摘要

目的:观察siRNA沉默KAP-1基因表达对人胰腺癌PANC-1细胞侵袭能力的影响,探求该基因作为治疗靶点的可行性.方法:针对KAP-1基因设计5条siRNA,构建真核表达载体,转染293T细胞筛选RNAi有效靶点,包装成重组慢病毒Lv-siRNA-KAP-1,感染胰腺癌细胞PANC-1成功后RT-qPCR检测RNA干扰沉默效果,Transwell小室检测细胞侵袭能力.Western blot检测波形蛋白表达.结果:转染48h后,5条siRNA能显著抑制KAP-1的蛋白表达;其中最有效的1条siRNA包装成重组慢病毒Lv-siRNA-KAP-1,感染PANC-1细胞侵袭能力明显受到抑制;感染后细胞侵袭数目(97.3±25.6)较空白对照组(253.3±20.6)与阴性对照组(213.2±19.4)明显减少,差异显著(P<0.05);感染后PANC-1细胞的波形蛋白表达下调.结论:Lv-siRNA-KAP-1能显著抑制PANC-1细胞KAP-1的表达,抑制PANC-1细胞侵袭能力及波形蛋白表达,KAP-1基因有可能成为胰腺癌基因治疗的新靶点.