目的:测定大鼠摄食量的变化来鉴定aFGF分子中具有调节摄食行为的活性部位,并进一步经皮下注射有活性的片段,观察对大鼠夜间摄食的影响,以此确定该活性片段外周给药的有效性.方法:将设计好的七种aFGF分子片段aFGF-(1-15),[D-Trp6]-aFGF-(1-15),[desaminoPhe1.D-Trp6]-aFGF-(1-15),[desaminoPhe1.Lys(ε-myristyl)16]-aFGF-(1-16),[Lys(ε-myristyl)16]-aFGF-(1-16),[D-Trp6.Lys(ε-myristyl)16]-aFGF-(1-16)及[Ala16]aFGF-(1-29),在无麻醉下于18:30-19:00从第三脑室留置的不锈钢导管微量注射,然后在19:00,22:00及07:00的时间点测定饲料箱内粉末饲料,分别计算3h(19:00-22:00)及12h(19:00-7:00)的摄食量.然后将发现具有生物活性的aFGF-(1-15)及[Ala16]aFGF-(1-29)两个片段经皮下注射给药,测定夜间摄食量.结果:aFGF-(1-15)以每只大鼠200ng脑室内给与后对摄食没有影响,以每只大鼠400ng脑室内给与后减少了大鼠的夜间摄食量(3h:3.0±0.2 vs 2.1±0.2;12h:18.5±0.5 vs 16.1±0.5,P<0.01);[Ala16]aFGF-(1-29)经脑室内投与,无论是在每只大鼠200ng(3h:4.9±0.2vs3.4±0.2;12h:19.3±1.2vs17.3±1.1,P<0.01);还是每只大鼠400ng给药均减少了大鼠的夜间摄食量(3h:3.6±0.1 vs 1.6±0.2;12h:19.9±0.8 vs 16.4±1.6,P<0.01),并且与aFGF-(1-15)相比,[Ala16]aFGF-(1-29)抑制摄食作用更明显;其余五种aFGF片段脑室内注射无论每只大鼠200ng还是在每只大鼠400ng,对大鼠夜间摄食均没有影响.aFGF-(1-15)和[Ala16]aFGF-(1-29)以80、100、300μg/kg大鼠皮下注射,其中仅[Ala16]aFGF-(1-29),300μg/kg皮下注射减少了大鼠的夜间摄食量(3h:3.9±0.2 vs 2.1±0.3;12h:19.8±0.5 vs 11.2±0.8,P<0.01),其余种类和剂量对大鼠夜间摄食均没有影响.结论:aFGF氨基酸序列的N末端及用丙氨酸代替aFGF氨基末端中半胱氨酸残基对摄食调节发挥重要作用.而第6位甘氨酸被右旋-色氨酸替代,第1位苯丙氨酸去氨基,第16位半胱氨酸被赖氨酸(ε-十四烷基)所代替,均没有摄食调节活性.部分活性片段外周给药同样可以发挥其生物活性.
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